中国生物工程杂志技术与方法基于模板切换的末端全长扩增方法苏建亚沈晋良南京农业大学植保学院南京摘要介绍一种称为的技术可用于克隆基因序列的末端非翻译区全长该技术是利用某些反转录酶在反转录达到的末端帽结构时表现出很高的加尾活性主要添加这一特点在反转录体系中加入一种带的寡核苷酸序列当反转录反应到达模板的末端帽结构时切换到以该寡核苷酸为模板继续进行反转录反应即可合成完整的一链且在其末端还带有一段额外的寡核苷酸序列用寡核苷酸序列为上游引物和基因特异性的下游引物进行即可扩增得到末端非翻译区的全长利用该技术克隆
中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology,2008,28(12):62~65
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基于模板切换的mRNA5′末端全长扩增方法
苏建亚 沈晋良
(南京农业大学植保学院 南京 21
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