第八章发酵培养方法及发酵动力学.pptVIP

第八章 发酵培养方法及发酵动力学 根据操作方式不同分为： 分批培养：底物一次装入罐内，在适宜条件下接种进行反应，经过一定时间后将全部反应系取出。 连续培养：反应开始后，一方面把底物连续地供给到反应器中，另一方面又把反应液连续不断地取出，使反应条件不随时间变化。 分批补料培养：介于分批与连续培养之间，又分为。 半分批培养（流加培养） 反复分批培养 反复半分批式培养 一、分批发酵 培养基中接入菌种以后，除了空气的进出，没有物料的加入和取出。 过程中发酵参数（菌浓、底物浓度、产物浓度等）都随时间变化。 F(X, P, S, T, ... , t) 分批发酵的特点 优点 可进行少量多品种的发酵生产 原料要求较粗放 操作简单 周期短 染菌机会少 缺点 产率低 不适于测定动力学数据 二、分批补料培养技术 分批补料培养特点 优点：在于使发酵系统维持低的基质浓度。 低基质浓度的优点为：①可以除去快速利用碳源的阻遏效应，并维持适当的菌体浓度，使不致于加剧供氧的矛盾。②避免培养基积累有毒代谢物。 缺点：增加了染菌机会；比生产速率下降。 适用范围：补料分批发酵广泛应用于抗生素、氨基酸、酶、核苷酸、有机酸等的生产。 三、连续培养技术 连续进出料液，保持发酵液体积恒定，使培养物在近似恒定状态下生长的培养方法。 达到稳态后，整个过程中所有发酵参数（X、P、S等）恒定不变。 优点：高效、可自控、产品质量稳定、降低劳动强度等 连续培养过程中的主要问题 易遭杂菌污染 生产菌株突变问题（菌种易退化） 回复突变的菌株有可能会取代生产菌株而成为优势菌株，使连续发酵过程失败。 培养基质量 工业培养基的组成成分，如玉米浆、蛋白胨和淀粉等，批与批之间有时会出现较大变化。 连续培养装置 均匀混合的生物反应器 恒化器 恒浊器 非均匀混合的生物反应器 活塞流反应器 第二节 发酵动力学基本概念 发酵动力学是研究发酵过程中菌体生长、基质消耗、产物生成的动态平衡及其内在规律。 1. 常用参数符号及意义 X：细胞干重（g/L） S：底物浓度（g/L） P：产物浓度（g/L) T：温度（oC） t：发酵时间（h） F：补料速率或体积流率（L/h） V：发酵体积（L） D：稀释率（F/V，h-1） 2. 发酵动力学中常用术语 得率(Y) ，是指被消耗的物质和所合成产物之间的量的关系，包括生长得率(Yx/s)和产物得率(Yp/s)。 生长得率：是指每消耗1g(或mo1)基质(一般指碳源)所产生的菌体重(g)，即Yx/s=ΔX/ΔS。 第三节 发酵动力学与发酵过程控制 1、微生物细胞的生长动力学 菌体生长速率与培养基中菌体浓度之比，它与微生物的生命活动有联系 在对数生长期， 是一个常数，这时 例题：某微生物的 ＝0.125 h-1，求td。 2、基质的利用 3、产物的形成 类型Ⅰ（相关模型）：产物的形成和菌体的生长相偶联，乙醇、葡萄糖酸、乳酸； 类型Ⅱ（部分相关模型）：产物的形成和菌体的生长部分偶联，柠檬酸、氨基酸； 类型Ⅲ（非相关模型）：产物的形成和菌体的生长不偶联，抗生素、微生物毒素。 二、发酵过程的代谢变化规律 (一) 分 批 发 酵 1. 菌体生长及基质利用动力学 Monod方程的适用范围。 3. 分批发酵过程的生产率 每升发酵液每小时产生的产物（或菌体）克数（g/L/h），是对发酵过程总成果的一种衡量。 (二) 连 续 发 酵 1. 基于细胞量（X）的物料平衡 简化后： 在连续培养技术中被称为稀释速率，用符号“D”表示 （等于培养液在罐中平均停留时间τ的倒数） 在稳定状态下，细胞的比生长速率等于稀释速率。 2. 基于限制性营养成分（S）的物料平衡 养分进入系统的速率－养分流出系统的速率－用于生长的养分消耗的速率－用于维持的养分消耗的速率－用于产物形成的养分消耗的速率 ＝养分在系统中积累的速率 在稳定状态下 ，则 以代入上式， 得 生产率 每升发酵液每小时产生的产物克数（g/L/h） b = DX（或DP） 请大家自己推导 第四节 发酵动力学计算实例 1. Monod方程有关参数计算 3. 酵母在需氧条件下，以乙醇为基质进行生长可表示下列总反应式：C2H5OH+aO2+bNH3→cCH1.704N0.149O0.408+dCO2 + eH2O 试求： （1）当RQ=0.66时，a、b、c、d和e的值。 （2）确定YX/S和YX/O2的值。 产物形成的速率 = 产物合成速率 – 产物移去速率