重组褐藻胶裂解酶表达体系的构建及诱导条件优化-南京中医药大学学报.PDF

南京中医药大学学报 年 月第 卷第 期 2018 5 34 3 JNanin UnivTraditChinMedVol.34No.3Ma 2018 — 227— j g y 重组褐藻胶裂解酶表达体系的构建及诱导条件优化 , 1 1* 1 1 23 1* , , , , , 郝瑶 李恒 龚劲松 蒋敏 许正宏 史劲松 ( , , ; , 糖化学与生物技术教育部重点实验室 江南大学药学院 江苏 无锡 江南大学生物工程学院 江苏 无锡 1. 2141222. ; , ) 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室 江苏 无锡 2141223. 214122 摘要: , 。 目的 对褐藻胶裂解酶基因al 进行外源表达 并优化诱导条件以实现褐藻胶裂解酶的高效表达 方法 以产褐 ycob , , 藻胶裂解酶菌株Cobetias.WG007为出发菌株 对克隆得到的褐藻胶裂解酶基因进行稀有密码子改造 构建重组质粒 ET p p ( ) , , 、 ( )、 在宿主 中进行诱导表达 对发酵培养基 异丙基 硫代半乳糖苷 诱 28a+ alcob EscherichiacoliBL21 LsS D IPTG y py β 、 、 。 / ( ) 导温度 诱导时机 诱导浓度及诱导时间进行系统优化以提高酶活 结果 构建了重组菌 E.coliBL21 LsS ET28a+ py p , , / , 最适培养基为 培养基 最佳诱导条件为 为 时加入终浓度为 的 在 下诱导 后 alcob SB OD600 1.0 0.1m