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细菌的营养与繁殖
糖类:葡萄糖、淀粉、纤维素、几丁质、透明质酸等 1、糖发酵实验 (carbohydrate fermentation test) 2、VP试验 ( Voges-Proskauer test ) 3、甲基红试验(methyl red test) 4、枸橼酸盐利用实验(citrate utilization test) 蛋白质与AA 1、吲哚试验(indole test) 2、明胶液化试验 (gelatin liquefaction test) 3、硫化氢试验 ( hydrogen sulfide test ) 热原(pyrogen)系指能引起恒温动物体温异常升高的致热物质。它包括内源性热原和外源性热原。外源性热原主要指细菌性热原,包括细菌的代谢产物、细菌尸体及内毒素。 微生物合成的一种能抑制或杀死近缘微生物的蛋白质类物质; 由质粒控制; 用于分型和流行病学调查。 四大类微生物菌落的特征 细菌菌落湿润、粘稠、易挑起,质地均匀,菌落各部位颜色一致。 放线菌菌落质地紧密,坚实、干燥、多皱, 呈绒状、粉状或颗粒状,菌落与培养基结合较紧,不易挑起;颜色多样,表面和背面颜色有时不一致。 霉菌菌丝粗长,菌落疏松,成绒毛状、蜘蛛网状、棉絮状,无固定大小,多有光泽,不易挑起,颜色不均一。 酵母菌大而厚,湿润,表面光滑,多数不透明,粘稠,菌落颜色单调,多数呈乳白色或红色。 稳定期(stationary phase) (1)特点:生长速率几乎等于死亡速率,细胞浓度不增加;基质大量消耗,代谢物大量积累;形成芽孢。 (2)生产上: 尽量延长稳定期 衰亡期(decline phase) (1) 特点:死亡速率大于生长速率; 菌体开始自溶; 细胞形态多样,染色性改变;芽孢成熟,可作为菌种保藏材料。 (2)生产上:掌握发酵时间 不同微生物对氧气的需求不同 5、水的活性 水活度值(water activity, aw),是指在一定温度和压力下,溶液的蒸汽压力与纯水蒸汽压力之比。 环境中水对微生物的可给性。 微生物控制的意义 防止疾病的发生和传播 防止食品和物品等的微生物污染 防止微生物对原材料的破坏(腐败和变质) 术语 灭菌(sterilization):杀灭所有的微生物,包括细菌的芽孢。 消毒(disinfection): 杀灭病原微生物; 防腐(antisepsis): 利用理化因素抑制体外微生物生长繁殖。 无菌(asepsis):不含活菌。 消毒剂(disinfectant): 用于消灭非生命物品上微生物的化学试剂。大部分消毒剂不能杀灭孢子。 防腐剂(antiseptic):用于活组织表面,以消灭微生物或抑制微生物生长的化学药剂。 化疗剂(chemotherapeutant):用来治疗微生物感染的药物,具有选择毒性。 控制微生物的物理方法 热力灭菌 (heat) 滤过除菌 (filtration) 辐射 (radiation) 超声波(ultrasonic) 渗透压(osmotic pressure) 热力灭菌法 种类: 干热灭菌 湿热灭菌(巴氏消毒法、煮沸、高压蒸气灭菌、流通蒸汽灭菌、间歇灭菌) 干烤灭菌 (1)160℃/2h烤箱(oven) (2)适用于耐高温物品, 如金属和玻璃制品,油类和粉末类。 (3)温度下降至90~100℃时方可开启箱门,否则干烤物品会骤冷,破碎或可燃物燃烧。 焚烧 (1)金属制品(镊子,接种环等)。 (2)动物尸体,废弃物。 巴氏消毒法(pasteurization) 适用于牛奶,酒类等食品的消毒法,可杀死其中的沙门氏菌和结核杆菌。 分为:低温维持法:62℃/30min, 高温瞬时法:72℃/15-30s, 超高温灭菌:74℃升到140 ℃ ,5s内迅速降温至74℃。 高压蒸汽灭菌(autoclaving) (1)含糖培养基:113℃(8Ib/in2 ),20~30min (2)耐高温物品(如培养基、敷料、手术器械、生理盐水等):121.3℃ ,103.46kPa(15 Ib/in2 ,1.05kg/cm2),20~30min 流通蒸汽灭菌 ( Flow steam sterilization) 特制的流通蒸汽灭菌器或普通蒸笼, 15-30min,杀死细菌繁殖体,不能杀死芽胞。 间歇灭菌(fractional sterilization) 用流通蒸汽进行多次间歇式反复灭菌。 紫外线(UV) (1)原理—DNA吸收能量,形成胸腺嘧啶二聚体,干扰DNA复制和蛋白质合成。 (2)紫外灯—30~40W,20~30min照射,照射距离。 (3)穿透力弱,不能透过玻璃,适用于物品表面和空气灭菌,
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