玻璃化冷冻於鼠胚之研究.docVIP

玻璃化冷凍於鼠胚之研究 Study on vitrification of mouse embryos 研究生：陳翔琦 Chen, Saing-Chi 指導教授：余祺 Yu, Chi 許岩得 Hsuuw, Yan-Der 黃富仁 Huang, Fu-Jen 【摘要】 胚玻璃化（vitrification）冷凍方法雖具備極快速之降溫速率，而克服傳統慢速冷凍法因胚內形成冰晶所導致冷凍胚解凍後存活率下降之問題，惟由於胚玻璃化冷凍法需使用高濃度具毒性之冷凍保護劑。因此如何降低可能造成冰晶之成因及改變胚於冷凍保護劑中之平衡方法或可解決之。基於此，於本論文擬探討胚於冷凍保護劑中之平衡方法（試驗一）以及囊胚液之引流（試驗三）對玻璃化冷凍鼠胚解凍後發育能力之影響；並進一步評估胚期對胚冷凍成功率之效應（試驗二）。在試驗一之結果顯示，胚於冷凍保護劑中之平衡過程，利用機械式吸放加速冷凍保護液進入胚內之平衡方法所產製之冷凍胚，其在解凍後之存活率明顯較利用靜置平衡法所產製者之冷凍胚為差（28.9 vs. 71.7 %, P ＜ 0.05）。然以靜置平衡法所產製之冷凍鼠胚於冷凍後1 h或於液態氮中保存10天後之解凍存活率（78.9 vs. 76.8%）及經8天體外培養後之發育能力（14.5 vs. 14.7%）均相近