现代微生物学与实验技术 林稚兰.pdf

基因工程 第 一 章　　基 因工程 原理 一、基 因工程概念 基 因工程原理 ，是一种 叫做基因操作技术 的原理 ，实际上就 是重组 。遗传工程 、基 因工程 、基 因操作 、重组 是相 同的概念 。把它作为一个过程 ，又叫分子克隆或基因克隆，就是 外来 插入到载体中，该过程的产物是人工重组 分子 。 克隆的含义是指无性繁殖后代 ，即后代不是 由 、 杂交产生 的 。核 外 可进行无性繁殖 ，所 以它们可 以作为克 隆的载 体 。核 外 在细菌中就是指质粒或噬菌体 ，在动物 中就是指 线粒体 或动物病毒 的 ，在植物是指质体 叶绿体 或植物病毒的 ，以上这些 本身可 以成环 。一般 情况下细菌克隆载体，即指质粒载体。 外来 插入载体的过程，实际上包括抽提 、重 组 及 转化三个过程 。先讲载体 ，载体 的发展 ，推动 了基 因工程 的发 展 。载体 ，主要指细菌质粒 ，噬菌体 （如 噬菌体、 噬菌 体 ），动 物 病 毒 或其他动物病毒改造成 的载体 ，植物 的农 杆菌质粒、植物病毒载体和低等真核生物的酵母载体等。本文主 要讲细菌质粒 （ 重组 研究，最早是 由微生物开始的，后来才发展至动 物和植物 。重组的载体分子经过改造转化到真核细胞中，再经过 胚胎发育，移植等手段，可以取得 良好效果。如：试管牛、冷冻 鱼的获得，医学上肝炎诊断、肝炎疫苗的利用等；亦可将品种优 良的外来 片段或药物基 因等引入细菌，如将胰岛素、脑下 垂体激素的基 因克隆转入细菌后 ，便可利用发酵罐进行大量生 产 。最明显的成果是干扰素，以前靠人血来提取，现可用遗传工 程技术来获得；白细胞介素 （用于提高机体免疫力 ，治疗肿 瘤 ）， （组织纤溶酶原 ，用于治疗脑血栓 ）等药物 ，以及杀 虫基 因、抗除草剂基 因等也可通过遗传工程来获得 ，再经过组织 培养 ，取得转基 因植物 ，进而形成优 良品种 。故遗传工程前景广 阔，在理论研究上 ，重组 技术 ，已推动 了分子生物学 、神 经活动研 究和肿瘤研 究的发展 ；在产业化上 已经或 即将取得重大 经济效益 。 下面介绍几个与基 因工程有关 的概念： 转 化 （ ：受体 菌接 受供 体 的 片段而获 得部分 的遗传性状 的现 象。 转 染 （ ：指把噬菌体或其他病毒 的 （或 ）抽 提 出来 ，让它 去感染感受态 的宿主 细胞 ，进而产 生正 常 的噬菌体或病毒后代 。 转 导 （ ：通 过 噬 菌 体 的媒 介 ，把 供 体 细 胞 的 小片段携带到受体细胞 中，通过交换与整合 ，使后者获得 前者部分遗传性状 的现象。 分子转化 （ ：把动物或植物的 导入细胞 。 基因转移 （ ）又称基 因转入， 介导的基 因 转移指将外源基 因移入动、植物体 内，改造其遗传结构 ，称为基 因转移或转基 因技术。 共 同感染 （ 转移 中需要助手 ，协 同侵入