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蛋白质化学
四、问答题
1.什么是蛋白质的一级结构?为什么说蛋白质的一级结构决定其空间结构?
2.什么是蛋白质的空间结构?蛋白质的空间结构与其生物功能有何关系?
3.举例说明蛋白质的结构与其功能之间的关系。
4.蛋白质的α—螺旋结构有何特点?
5.蛋白质的β—折叠结构有何特点?
6.简述蛋白质变性作用的机制。
7.什么是蛋白质的变性作用?蛋白质变性后哪些性质会发生改变?
8.蛋白质有哪些重要功能。
9.下列试剂和酶常用于蛋白质化学的研究中:CNBr、异硫氰酸苯酯、丹黄酰氯、脲、
6mol/L HCl、β-巯基乙醇、水合茚三酮、过甲酸、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶。其中哪一
个最适合完成以下各项任务?
(1)测定小肽的氨基酸序列。
(2)鉴定肽的氨基末端残基。
(3)不含二硫键的蛋白质的可逆变性;如有二硫键存在时还需加什么试剂?
(4)在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。
(4)在蛋氨酸残基羧基侧水解肽键。
(5)在赖氨酸和精氨酸残基羧基侧水解肽键。
10.分别指出下列酶能否水解与其对应排列的肽,如能,则指出其水解部位。
肽 酶
(1)Phe-Arg-Pro 胰蛋白酶
(2)Phe-Met-Leu 羧肽酶B
(3)Ala-Gly-Phe 胰凝乳蛋白酶
(4)Pro-Arg-Met 胰蛋白酶
11.用下列哪种试剂最适合完成以下工作:溴化氰、尿素、β-巯基乙醇、胰蛋白酶、过酸、
丹磺酰氯(DNS-Cl)、6mol/L盐酸、茚三酮、苯异硫氰酸(异硫氰酸苯酯)、胰凝乳蛋白酶。
(1)测定一段小肽的氨基酸排列顺序
(2)鉴定小于10-7克肽的N-
(3)使没有二硫键的蛋白质可逆变性。如有二硫键,应加何种试剂?
(4)水解由芳香族氨基酸羧基形成的肽键
(5)水解由甲硫氨酸羧基形成的肽键
(6)水解由碱性氨基酸羧基形成的肽键
12.扼要解释为什么大多数球状蛋白质在溶液中具有下列性质。
(1)在低pH时沉淀。
(2)当离子强度从零逐渐增加时,其溶解度开始增加,然后下降,最后出现沉淀。
(3)在一定的离子强度下,达到等电点pH值时,表现出最小的溶解度。
(4)加热时沉淀。
(5)加入一种可和水混溶的非极性溶剂减小其介质的介电常数,而导致溶解度的减小。
(6)如果加入一种非极性强的溶剂,使介电常数大大地下降会导致变性。
13.某种溶液中含有三种三肽:A肽:Tyr - Arg - Ser , B肽:Glu - Met - Phe 和C肽:Asp - Pro - Lys , α- COOH基团的pKa 为3.8; α-NH3基团的pKa为8.5。在哪种pH(2.0,6.0或13.0)下,通过电泳分离这三种多肽的效果最好?
14.利用阳离子交换层析分离下列每一对氨基酸,哪一种氨基酸首先被pH7缓冲液从离子交换柱上洗脱出来。(a)Asp和Lys(b)Arg和Met(c)Glu和Val(d)Gly和Leu(e)Ser和Ala
15. 氨基酸的定量分析表明牛血清白蛋白含有0.58%的色氨酸(色氨酸的分子量为204)。
(a)试计算牛血清白蛋白的最小分子量(假设每个蛋白分子只含有一个色氨酸残基)。
(b)凝胶过滤测得的牛血清白蛋白的分子量为70,000,试问血清白蛋白分子含有几个色氨酸残基?
16. 胃液(pH=1.5)的胃蛋白酶的等电点约为1,远比其它蛋白质低。试问等电点如此低的胃蛋白酶必须存在有大量的什么样的官能团?何种氨基酸才能提供这样的基团?
17.下列试剂和酶常用于蛋白质化学的研究中:
CNBr 异硫氰酸苯酯 丹磺酰氯 脲 6mol/LHCl β-巯基乙醇 水合茚三酮 过甲酸 胰蛋白酶 胰凝乳蛋白酶其中哪一个最适合完成以下各项任务?
(a)测定小肽的氨基酸序列。
(b)鉴定肽的氨基末端残基。
(c)不含二硫键的蛋白质的可逆变性。若有二硫键存在时还需加什么试剂?
(d)在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。
(e)在蛋氨酸残基羧基侧水解肽键。
(f)在赖氨酸和精氨酸残基侧水解肽键。
18. 由下列信息求八肽的序列。
(a)酸水解得 Ala,Arg,Leu,Met,Phe,Thr,2Val
(b)Sanger试剂处理得DNP-Ala。
(c)胰蛋白酶处理得Ala,Arg,Thr 和 Leu,Met,Phe,2Val。当以Sanger试剂处理时分别得到DNP-Ala和DNP-Val。
(d)溴化氰处理得 Ala,Arg,高丝氨酸内酯,Thr,2Val,和 Leu,Phe,当用Sanger试剂处理时,分别得DNP-Ala和DNP-Leu。
19. 下列变化对肌红蛋白和血红蛋白的氧亲和性有什么影响?
(a)血液中的pH由7.4下降到7.2。
(b)肺部CO2分压由6kPa(屏息)减少到2
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