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- 2019-02-14 发布于上海
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菌种保藏冷冻干管的制备
* 河北科技大学生物科学与工程学院 河北省发酵工程技术研究中心 徐亲民 * 水分在冰冻状态下直接升华而干燥 冷冻干燥的三要素: 真空——降低水的蒸汽压以加速水分的蒸发 冷冻——使水蒸气冷凝以减轻真空泵负荷,加速干燥 温度——达到进一步加速干燥的目的 冷冻干燥的优点: 对微生物的生物活性影响小 所得干粉疏松,溶解性好 水分含量低 由于同时满足干燥和真空两个菌保要素,因而保存时间长,保存过程不易失活和退化 * 取质地均匀、厚实(壁厚1 mm)、无毛点、无气泡的硬质玻璃专用菌种冷冻管(图1),清洗干净后在管内放置打印有菌种简略名称和编号的纸条标签(图1左边的单管式冷冻管置于熔封区和装液区之间,右边的套管式冷冻管置于内外管之间),单管式冷冻管管口和套管式冷冻管内管管口插入缠绕松弛的棉签,用牛皮纸包裹,于121℃灭菌30分钟,取出置37℃孵育24小时,重复灭菌一次,105~110℃烤干(有硅胶指示剂的要使硅胶达到深蓝色),置干燥器内备用。 * 推荐尺寸:(左) Φ8×100,璧厚1 mm,球径12 mm;(中、右)外管Φ12×100,璧厚0.8-1 mm;内管Φ9×50,壁厚0.5 mm。 棉塞 熔封区 放标签处 装液区 外管 熔封区 棉塞 内管 放标签处 变色硅胶 棉塞 * 取市售新鲜、清洁、无抗生素污染的牛奶200 g,在5000 r/min下离心10分钟,除去上层奶皮,如此重复两次。然
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