大腹园蛛鞭状腺蛛丝蛋白N端结构域的克隆表达及圆二-ricescience.PDF

21 卷 5 期 生命科学研究 灾燥造援21 晕燥援5 年 月 圆园17 10 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻 砸藻泽藻葬则糟澡 Oct. 圆园17 DOI ：10.16605/ki.1007-7847.2017.05.004 腹园蛛鞭状腺蛛丝蛋白N 端结构域的克隆表达 及圆二色谱分析 a b b b* 雪 陈格飞 张晓玲 孟 清 , , , (东华大学 a. 环境科学与工程学院; b. 生物科学与技术研究所, 中国上海201620) 摘 要 鞭状腺蛛丝是6 种蛛丝中延展性最好的丝, 由鞭状腺蛛丝蛋白(FlSp)构成, 具有极大的潜在应用价值 : 目前, 有关FlSp 的末端功能模块(NT 和CT)编码基因的报道极少, 且其结构和功能均尚未明确, 这在一定程度 上限制了鞭状腺蛛丝的仿生 现利用5 -RACE 的方法, 以大腹园蛛总RNA 和基因组DNA 为模板, 首次获取了 大腹园蛛FlSp NT 模块(FlSp_A.v-NT)的完整编码基因, 并对其成功进行了克隆 表达及纯化, 产量可达60 mg/L; 尧 同时, 利用圆二色谱(circular dichroism, CD)对FlSp_A.v-NT 的二级结构进行了分析, 结果显示其主要以 螺旋 构象存在, 这是首次对FlSp NT 的二级结构进行探索, 为后续FlSp NT 结构功能的研究提供了材料, 奠定了研 究基础 关键词 大腹园蛛; 蛛丝蛋白; 5 -RACE 方法; FlSp_A.v-NT 编码基因; 克隆表达; 二级结构 : 中图分类号 Q781 文献标识码 A 文章编号 1007 7847(2017)05 0392 07 : : : - - - Cloning and Expression and CD Spectra of the N-terminal Domain of Flagelliform Spidroin from Araneus ventricosus a b b b* LI Xue , CHEN Ge-fei , ZHANG Xiao-ling , MENG Qing (a. College of Env ironmental Science and Engineering; b. Institute of Biological Sc iences and Biotechnology , Donghua Univ ers ity, Shanghai 201620, China) Abstract: T