凡纳滨对虾C型凝集素LvLc1的特征和活性分析-水产学报.PDF

第41 卷 第 11 期 水 产 学 报 Vol. 41, No. 11 2017 年 11 月 JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA Nov., 2017 文章编号: 1000-0615(2017)11-1710-09 DOI: 10.11964/jfc.20170410808 凡纳滨对虾C型凝集素(LvLc1)的特征和活性分析 1 1 1 1* 2 1 李俊烨 ， 宋巧珍 ， 张亦陈 ， 刘逸尘 ， 耿绪云 ， 孙金生 (1. 天津师范大学生命科学学院，天津市动植物抗性重点实验室，天津 300387; 2. 天津市水生动物疫病预防控制中心，天津 300221) 摘要：C 型凝集素是一种依赖于Ca2+ 而发挥功能的糖蛋白，在一线的固有免疫防御过程 中发挥着重要作用。围绕对虾C 型凝集素开展深入研究，不仅可以丰富无脊椎动物固有 免疫学内容，还有望将其开发为具有免疫增强效果的活性饵料，应用于对虾的健康养 殖。本实验根据实验室前期转录组信息提示克隆获得了凡纳滨对虾一种新的C 型凝集素 基因(LvLc1 , GenBank注册号：KY937940) 。生物信息学分析显示LvLc1 基因的开放阅读框 全长891 bp ，编码296个氨基酸，该基因编码的蛋白质含有一个保守的糖识别结构域 (carbohydrate recognition domain, CRD) ，该结构域中具有潜在的半乳糖结合位点(QPD motif) ，进化发生分析显示LvLc1 与来自节肢动物的甘露糖结合凝集素家族成员聚类在一 起。对LvLc1 基因的CRD结构域进行了原核重组表达与蛋白活性分析研究，结果显示： 2+ + – 重组目的蛋白(rLvLc1)在Ca 存在的条件下，对多种病原菌(G 、G 和真菌)具有凝集作 用，其凝集活性可被半乳糖、甘露糖、脂多糖等多种病原相关分子模式所抑制。研究表 明，LvLc1 作为C- 型凝集素家族一个新成员，可能通过重要的模式识别受体作用，参与 机体应答病原微生物侵染的防御过程。 关键词: 凡纳滨对虾；C型凝集素；糖识别结构域；重组表达；凝集；糖识别活性 中图分类号: S 917.4 文献标志码: A [2] 凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)属于节肢 cular patterns, PAMPs)来辨别外来病原微生物 。固 动物门(Arthropoda) 、甲壳纲(Crustacen) 、十足目 有免疫对病原微生物的识别由作为PRRs 的几组 [3 ] (Decapoda) ，是