小鼠载脂蛋白A1apo-A1酶联免疫诊断-ELISA试剂盒.DOCVIP

PAGE PAGE 3 喹乙醇(Olaquindox)酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 1 使用目的： 本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织（如鸡、牛肉和猪肉），鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中喹乙醇(Olaquindox)残留的定量检测。 2 实验原理 本试剂盒采用竞争ELISA方法，在微孔板包被有喹乙醇(Olaquindox)偶联抗原，加入喹乙醇(Olaquindox)标准品或样品，游离喹乙醇(Olaquindox)与微孔条上预包被的喹乙醇(Olaquindox)偶联抗原互相竞争抗喹乙醇(Olaquindox)抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中喹乙醇(Olaquindox)含量成反比，通过标准曲线计算样品中喹乙醇(Olaquindox)的含量。 3 试剂盒组成 3.1 预包被的喹乙醇(Olaquindox)偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。3.2喹乙醇(Olaquindox)标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0ppb, 1 ppb,3 ppb, 9 ppb,27ppb,81 ppb 3.3抗喹乙醇(Olaquindox)抗体酶结合物：1瓶（6ml）。3.4显色液A：1瓶（6ml）。3.5显色液B：1瓶（6ml）。3.6终止液：1瓶（6ml），2M硫酸。3.7样本稀释液：1瓶（10×, 6ml），用于样品稀释用。3.8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。3.9说明书一份。 4 需要而未提供的材料4.1 设备4.1.1波长450nm酶标仪。 4.1.2粉碎机。4.1.3量筒。4.1.4振荡器。4.1.5漏斗。4.1.6Whatman No 1或相当的滤纸。4.1.7微量移液器。4.2 试剂4.2.1去离子水或蒸馏水。4.2.2 甲醇。5 贮存5.1 试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻5.2 未用完的微孔板应该密封干燥保存6 注意事项6.1 使用试剂盒前请仔细阅读说明书。6.2 不要使用过期试剂盒。6.3 试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（25±2℃），建议至少回温2小时。6.4 标准品中含有喹乙醇(Olaquindox)，使用时应特别注意，操作时应带手套。6.5 终止液中含有硫酸，使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。6.6 不同标准品、样品所用吸头不能混用，否则会影响试验结果。6.7 不同批号试剂盒中的试剂不得混用；不同标准品、样品所用吸头不得混用，否则会影响实验结果。6.8 稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液，否则会影响实验结果6.9 混合试剂时应避免起泡。7 工作液准备7.1喹乙醇(Olaquindox)标准品溶液：0ppb, 1 ppb,3 ppb, 9 ppb,27ppb,81 ppb 7.2 浓缩洗涤液：用蒸馏水按1:20(1+19)稀释备用 7.3 样本稀释液：：用蒸馏水按1:10(1+9)稀释备用7.3 显色剂：已备用，避免光线直照7.4 反应终止液：已备用8 样品处理程序（样品在提取过程中，要严格按说明书操作，提取过程中应准确稀释，否则会出现结果不准确，样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存）8.1取10g粉碎的样品，加 20ml 70%甲醇溶液8.2强力振荡3分钟8.3用Whatman No 1滤纸过滤8.4取100μl处理后的样品，加入400μl样本稀释液8.5取50μl稀释液进行分析（稀释倍数10）动物组织前处理 8.6准确称取1±0.05 g匀浆后的组织样品到50 ml的聚苯乙烯离心管中；加入3ml乙腈--丙酮提取溶液，2000rpm剧烈震荡20s后4000r/min以上离心5min 8.7取上清液0.8ml在50℃氮气流下吹干 8.8加入2mL1×样品稀释液Ⅰ, 750rpm涡旋20s 8.9取100?l用于分析 饲料前处理方法 8.10准确称取1±0.05 g粉碎饲料样品到50 ml的聚苯乙烯离心管中；加入4ml乙腈，1ml丙酮，2000rpm剧烈震荡20s后4000r/min以上离心3min 8.11取上清液0.7ml在50℃氮气流下吹干 8.12加入1mL1×样品稀释液Ⅰ,涡旋20s，取出100ml加到900ml 1×样品稀释液Ⅰ，混匀后取100?l用于分析 牛奶前处理方法 8.13取1 ml牛奶样品到2 ml离心管中；用 1×样品稀释液Ⅱ稀释30倍，混匀后取100?l用于分析 奶粉前处理方法 8.14准确称取0.3g奶粉样品到7 ml的聚苯乙烯离心管中；加入2ml 1×样品稀释液Ⅲ，2 ml正己烷，震荡混匀 8.154000r/min以上离心5min，去除有机层和中