无赖氨酸激酶4在小鼠气管上皮细胞液体转运中的作用.PDF

中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2019, 41(1): 103–107 DOI: 10.11844/cjcb.2019.01.0012 无赖氨酸激酶4在小鼠气管上皮细胞液体转运中的作用 刘宏飞 候亚鹏 周祉妤 张红蕾 丁炎 聂宏光* ( 中国医科大学基础医学院干细胞与再生医学研究室, 沈阳 110122) 摘要 该研究探讨了无赖氨酸激酶4(with no lysine kinase 4, WNK4)对于小鼠气管上皮细胞 液体转运中的调节作用。在原代培养的小鼠气管上皮细胞中, 应用siRNA特异性沉默WNK4基因, 半定量PCR和Western blot 实验验证沉默效率; 随后应用尤斯灌流装置和Western blot 实验记录该激 α 酶的低表达对小鼠气管上皮细胞的短路电流及钠离子通道 -亚基蛋白表达水平的影响。半定量 PCR和Western blot结果显示, 该研究选用的siRNA序列可以沉默WNK4的表达。尤斯灌流和Western 报 α blot结果显示, 沉默该激酶后, 小鼠气管上皮细胞的阿米洛利敏感性电流和钠离子通道 -亚基蛋白 WNK4 α 表达明显增加。该研究表明, 降低 基因表达能增加小鼠气管上皮细胞的上皮钠离子通道 -亚 基蛋白表达, 促进钠离子转运, 此过程可能参与相关水肿性肺疾患的修复。 学 关键词 无赖氨酸激酶4; 小鼠气管上皮细胞; 上皮钠离子通道; 短路电流 Role of with No Lysine Kinase 4 in Liquid Transport of 学 Mouse Tracheal Epithelial Cells 物 Liu Hongfei, Hou Yapeng, Zhou Zhiyu, Zhang Honglei, Ding Yan, Nie Hongguang* (Department of Stem Cells and Regenerative Medicine, China Medical University, Shenyang 110122, China) Abstract The aim of this work was to investigate the regulation of with no lysine kinase 4 (WNK4) 生 on the fluid transport of mouse tracheal epithelial cells. The siRNA-specific silencing of WNK4 gene was used in primary cultured mouse tracheal epithelial cells, and its silencing efficiency was verified