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实验四 感病植及其病原细菌
实验目的 通过显微观察，识别植物病原细菌的基本形态。 通过具体操作，掌握细菌革兰氏染色的方法。 实验材料和用具 核桃黑斑病菌（Xanthomonas juglandis） 杨树根癌病菌（Agrobacterium tumefaciens ） 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis ） 用具：载玻片、盖玻片、镊子、纱布、酒精灯、接种环、吸水纸、香柏油、二甲苯、蒸馏水 染色液：结晶紫溶液、碘液、95%乙醇、番红 实验方法与步骤 革兰氏染色法 1、制菌液 在载玻片上滴一滴脱离子水，用灭过菌的接种针从培养斜面上挑取少量细菌与水滴充分混合。 2、制涂片 用消毒的接种环挑取此悬浮液抹在另一载玻片的一端，充分铺展，制成涂片。 3、干燥 让涂抹液自行干燥或放在微弱的火焰上，离火焰远些，使之干燥。 4、固定 将干燥了的涂面，菌面向上，慢慢地通过火焰3次。 5、用结晶紫溶液染色30-60秒钟后，除去多余的染色液。 6、用碘液浸1分钟后水洗，放在滤纸上脱水，风干。 7、95%乙醇覆盖涂面15-30秒钟后，水洗，风干 8、用番红溶液复染2分钟，然后水洗，风干后镜检。 革兰氏阳性细菌染成紫色，而阴性细菌则被染成淡红色。 作业 记录所作菌种的革兰氏染色反应及检测结果。 * * * *
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