SET在乳腺癌中的生物学作用的初步探讨.DOCVIP

SET在乳腺癌中的生物学作用的初步探讨 李杰*，任晓虎，黄培武，洪文旭，杨细飞，刘建军 深圳市疾病预防控制中心现代毒理学重点实验室 *Email：lijie040911@163.com 目的：乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，乳腺癌病因相当复杂，与遗传因素、激素、免疫及各种环境因素（理化、生物因子及生活方式等）有关。但随着细胞生物学和分子生物学理论和技术的发展，人们已认识到乳腺癌是一种多基因变异引起的疾病，提高对乳腺癌发生发展中相关基因异常的认识，是乳腺癌防治的关键。SET 蛋白，是体内主要的丝-苏氨酸蛋白磷酸酶2A 的胞内抑制蛋白，PP2A 被认为可能是一个潜在的肿瘤抑制因子，所以SET 蛋白与肿瘤发生也密切相关。SET 蛋白功能多样，涉及体内多种生理过程，但其与乳腺癌的关系尚不清楚。本研究拟构建SET干扰重组质粒，观察SET基因对人乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞增殖的影响，探讨SET基因对乳腺癌细胞转移及侵袭的影响。 方法：培养MDA-MB-231细胞，利用慢病毒介导的RNA干扰技术构建SET缺陷表达的乳腺癌细胞株；利用MTT吸光度与细胞数目之间的关系绘制细胞生长曲线，并利用公式计算细胞倍增时间；采用划痕实验观察肿瘤细胞迁移能力的改变，并利用Transwell实验再次检测SET缺陷对肿瘤细胞迁移能力的影响；利用Transwell实验检测肿瘤细胞侵袭能力的改变。 结果：首先利用慢病毒介导的RNA干扰技术成功构建了SET干扰重组质粒，筛选并得到了稳定干扰SET的乳腺癌细胞。然后以乳腺癌细胞、SET缺陷乳腺癌细胞及空白质粒对照组乳腺癌细胞为受试细胞，探讨了SET改变与乳腺癌细胞的细胞增殖、肿瘤细胞迁移及肿瘤细胞侵袭等之间的相互关系。MTT实验结果显示，慢病毒介导的SET的缺陷表达显著性降低了乳腺癌细胞的增殖能力；划痕实验与Transwell实验结果均表明SET的下调表达显著性抑制了肿瘤细胞的迁移能力；Transwell侵袭实验显示SET缺陷显著抑制了肿瘤细胞的侵袭能力。 结论：本研究通过从细胞增殖、细胞迁移及侵袭等方面，发现SET可能通过不同途径参与了人体乳腺癌细胞形成、发生、发展的全过程，为阐明乳腺癌的形成与发展机制提供了理论基础。