巴伦葛兹类芽孢杆菌茁鄄葡萄糖苷酶的表达酶学-食品科学技术学报.PDF

第37卷 第1期 食 品 科 学 技 术 学 报 Vol.37 No.1 20 2019年1月 Journal of Food Science and Technology Jan. 2019 栓狮狮狮狮狮狮狮狮栓狮 狮 专题研究专栏栓 栓狮狮狮狮狮狮狮狮 编者按:酶作为一种生物催化剂,具备高效性、专一性及催化条件温和、无污染等特点,在现代食品 生产中扮演着重要角色。 酶工程技术是生物工程最重要的组成部分,该技术的每一次重大突破都 直接促进了人类科学技术的进步;而新酶的发现、酶特性的研究、酶制剂的制备以及酶的固定化、酶 的修饰与改造及酶反应器等,一直是酶工程研究领域的重点与热点。 本期的3篇研究论文,从酶的 产生、性质及固定化特点等方面入手,分别就茁鄄葡萄糖苷酶的性质及结构解析、葡聚糖酶的发酵条件 优化,以及蔗糖异构酶的固定化方法等方面展开深入探讨,以期为新酶源的开发、新型酶制剂的研制、 固定化酶反应器等酶工程技术的发展及其在食品工业中的应用提供基础数据和理论参考。 (主持人:李秀婷教授) doi:10.3969/ j.issn.2095鄄6002.2019.01.004 文章编号:2095鄄6002(2019)01鄄0020鄄08 引用格式:黄平,吴世旺,江正强,等. 巴伦葛兹类芽孢杆菌茁鄄葡萄糖苷酶的表达、酶学性质及结构解析[J]. 食品科学技术学 报,2019,37(1):20-27. HUANG Ping,WU Shiwang,JIANGZhengqiang,et al. Expression,biochemical characterization and structure resolution of茁鄄glucosidasefromPaenibacillus barengoltzii[J]. Journal of Food Science and Technology,2019,37(1):20-27. 巴伦葛兹类芽孢杆菌茁鄄葡萄糖苷酶的表达、 酶学性质及结构解析 黄摇 平,摇 吴世旺,摇 江正强,摇 杨绍青* (中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京摇 100083) 摘摇 要:从克隆巴伦葛兹类芽孢杆菌CAU904 中克隆得到一个茁鄄葡萄糖苷酶基因,并在大肠杆菌 中进行了异源表达,研究了重组酶的酶学性质,进一步解析了该酶的晶体结构。 研究结果表明,该 酶的最适温度和pH值分别为50 益和7郾5。 该酶底物特异性较广,能够水解茁鄄1,2、茁鄄1,3、茁鄄1,4、茁鄄 1,6鄄糖苷键等在内的多种糖苷键,对昆布多糖、大麦茁鄄葡聚糖和地衣多糖等聚糖均有水解作用。 晶 体结构信息表明,该酶呈现糖苷水解酶(GH)3 家族典型的多结构域结构,其催化口袋由类似 (琢/茁) 的三明治结构域和(茁/ 琢) 折叠桶结构域中间的loop 构成,其中芳香氨基酸残基Trp748侧 5 8 链提供鄄1位结合位点,Trp749侧链提供+1位结合位点,Trp131侧链提供 +2 位结合位点,这些芳 香氨基酸残基形成了一个小的口袋和疏水性环境,不利于转糖苷反应。 关键词:巴伦葛兹类芽孢杆菌;茁鄄葡萄糖苷酶;异源表达;酶学性质;晶体结构 中图分类号:TS201郾3;Q814摇 摇 摇 摇 摇 文献标志码:A 摇 摇 纤维素是由茁鄄D鄄葡萄糖残基通过茁鄄1,4鄄糖苷键 的酶称为纤维素酶。 纤维素酶按其催化作用特点分 连接而成的直链多糖,一般含有3000 ~10000个葡 为三类:内切鄄1,4鄄茁鄄D鄄葡聚糖酶(EC 3郾2郾1郾4)、外 萄糖残基。 通常将能水解裂纤维素的茁鄄1,4鄄糖苷键 切鄄茁鄄1,4鄄D鄄葡聚糖酶(EC3郾4郾1郾91)、茁鄄葡萄糖苷酶 收稿日期:2018 12 28 基金项目:国家自然科学基金面上项目。 第一作者:黄摇 平,男,博士研究生,研