第七章遗传育种.ppt

第七章???? 微生物的遗传变异 几个概念： （1） 遗传型（Genotype）又称基因型 它是指某一生物个体所含有的全部遗传因子的总和。遗传物质起决定性作用，而外界环境可以影响其表型，即： 遗传型+环境条件=表型 （2）表型：指肉眼可以观察到的某一生物所有具有的一切外部特征。 （3）变异：指生物体在内因或外因的作用下引起的遗传物质的改变。 （4）饰变（modification）：是指外表的修饰性改变，意即一种不涉及遗传物质结构改变而只发生在转录、转译水平上的表现变化。它是不遗传的，是一种外表现象。 第一节?? 遗传变异的物质基础 一、三个经典试验 （一） 转化实验： 1928年英国的细菌学家格里菲斯（Griffith）首先发现肺炎球菌的转化现象。肺炎球菌是一种病原菌，存在两种类型：光滑型（S）和粗糙型（R，Rough）S型有荚膜，菌落光滑，能使人和动物得病死亡。R型无荚膜，粗糙，不能使人和动物得病。 （二） 噬菌体感染实验： 首先将Ecoli培养在放射性32PO43—或 35SO42—作为P或S源的培养基中，结果35S 存在于蛋白质，而32P只存在于核酸，然后让T2噬菌体侵染，从而使T2被标记上S和P，接着让具放射性的T2感染不含放射性元素的大肠杆菌，并在噬菌体复制前进行搅动并离心，得上清液和沉淀物，结果发现S位于上清液而P位于底部，这说明蛋白质外壳没有进入Ecoli，由于搅动而脱落，且较轻，故位于上部，而DNA进入菌体，且较重，被沉淀下来。对沉淀液进行培养发现有大量完整的T2噬菌体出现，因此证实了DNA是遗传信息的载体。 （三） 植物病毒的重建实验： 1965年美国学者法朗克---康勒特（H、Fraenrel—Conrat）用含RNA的烟草花叶病毒进行了植物病毒重建实验。他将TMV（烟草花叶病毒）放在一定浓度的苯酚溶液中振荡，将它的蛋白质外壳与RNA核心分离，RNA在没有蛋白质包裹的情况下，也能感染烟草，且能分离出正常的病毒离子，证明RNA是遗传物质，另外，他还选用了另一株与TMV近似的霍氏车前花叶病毒（HRV）进行实验。 二、遗传物质在微生物细胞内存在的部位和方式： 1、细胞水平 2、细胞核水平 3、染色体水平 （1）染色体数： （2）染色体倍数 4．核酸水平 （1）核酸种类 （2）核酸结构 （3）DNA长度 5、基因水平 6、密码子水平 7、核苷酸水平 （二）原核生物的质粒 1．定义和特点 凡游离于原核生物核基因组以外，具有独立复制能力的小型共价闭会环状的dSDNA分子，即 cccDNA，就是典型的质粒。 严紧型复制控制： 松弛型复制控制： 质粒消除： 附加体： 整合： 2．质粒在基因工程中的应用 操作的优点： ①体积小，便于DNA的分离和操作； ②呈环状，使其在化学分离过程中能保持性能稳定； ③有不受核基因组控制的独立复制起始点； ④拷贝数多，使外源DNA可很快扩增；⑤存在抗药性基因等选择性标记，便于含质粒克隆的检出和选择。 E.coli的pBR322质粒 其优点是： ①体积小 ②高拷贝数（ 20－30个／细胞）； ③可扩增到含1000－3000个质粒； ④分离容易； ⑤可插入较多的外源DNA（不超过10kb）； ⑥结构完全清楚 ⑦有两个选择性抗药标记（ ③可方便地通过转化作用导入宿主细胞。 3．质粒的分离与鉴定 4．质粒的种类 大致可分5类， 接合质粒； 抗药性质粒； 产细菌素和抗生素质粒； 具生理功能的质粒； 产毒质粒等。见P199表7-4 5．典型质粒简介 （1）F质粒 （2）R质粒 （3）Col质粒 （4）Ti质拉 （5）Ri质粒 （6）mega质粒 （7）降解性质粒 第二节? 基因突变和诱变育种 一、??? 基因突变： 简称突变，是指生物体内遗传物质的分子结构突然发生的可遗传的变化。突变机率一般在10-6---10-9。 （一） 突变类型： 突变的类型很多，我们按突变后极少数变株的表型是否能在选择培养基上加以鉴别区分，分为选择性突变株（Selection Mutont）：凡能用选择性培养快速选择出来的突变株。反之称为非选择性突变株。 选择性突变株有：营养缺陷型、抗性突变型、条件致死突变型。 非选择性突变株有：形态突变型、抗原突变型和产量突变型。 （1）?? 营养缺陷型（Auxotroph）： 某野生型菌株（Wild Tyain Strain）由于发生基因突变而丧失合成一种或几种生长因子的能力。因而无法在基本培养基上正常生长繁殖的变异类型称----。加上某生长因子可生长。 （2）?? 抗性突变型：（Resist Mutant） 由于基因突变而使原始菌株产生了对某种化学药物或致死物理因子抗性的