经密码子优化的葡萄糖醛酸酶在Ecoli中的表达.PDF

第22卷第6期 无锡轻工大学学报 V01．22No．6 2003年11月 ofWuxi Journal of Nov．2003 UniversityLightIndustry =======；================2=======；；==============一 文章编号：1009—038X(2003)06—0018—04 经密码子优化的葡萄糖醛酸酶在E．coli中的表达 杜兴兰1’2， 邵蔚蓝2。 (1．江南大学工业生物技术教育部重点实验室，江苏无锡214036；2．南京师范大学生命科学 院，江苏南京210097) 摘 要：对口一葡萄糖醛酸酶基因(Ag以)的稀有密码子进行了优化，经过稀有密码子优化的基因在 pTrc99A栽体中由于二级结构稳定性的增加使得目的基因的表达水平比原始基因还要低．在权衡 几个栽体后使用本实验室构建的热激载体pAT，可以降低mRNA二级结构自由能(Ag)，得到了 d一葡萄糖醛酸酶的高表达，结果充分说明了mRNA二级结构的自由能对外源基因的表达的影响． 关键词：mRNA二级结构；自由能；口一葡萄糖醛酸酶 中图分类号：Q812 文献标识码：A TheEffectofmRNA Structure Secondary on口一glucuronidaseExpression DU Wei—lan2。 Xing-lanl¨．SHAO (1．The ofIndustrial ofEducation，Schoolof KeyLaboratory Biotechnology．Ministry ofLife Normal 210097， YangtzeUniversity，Wuxi214036，China；2．CollegeSciences，NanjingUniversity，Nanjing China) Abstract：Itiswellknownthattheamountof E．colicells heterogeneousproteinsproducedby onvarious asthe numberand ofthe inthe factors，such stability depends copy expressionplasmid cells，the oftranslationinitiation，andthe ofthe inE．coli efficiency stabilitysynthesizedprotein of initiationin iSdeterminedthestabilizationofmRNA cells．The translation E．coli by efficiency 5’end structureandthe ofrare this we secondary frequencycondons’u