丛枝菌根真菌对番茄生长根际酶活和微生物数量的影响.docVIP

丛枝菌根真菌对番茄生长根际酶活和微生物数量的影响 摘要：以番茄品种苏粉11号为材料，通过在有机基质中添加丛枝菌根真菌（AMF），研究AMF对番茄幼苗生长、侵染率、微生物数量和根际酶活的影响。结果表明，AMF显著提高了番茄幼苗的株高、茎粗、干质量、鲜质量和菌根侵染率，同时增加了幼苗根际细菌和放线菌数量，降低真菌数量，并提高蔗糖酶、中性磷酸酶、过氧化氢酶和脲酶的活性。说明添加AMF能够有效地提高根际微生物多样性，维持植株根际生态系统的稳定性，从而促进番茄植株的生长。 关键词：丛枝菌根真菌；生长；侵染率；微生物数量；根际酶活 中图分类号：S436.412文献标识码：A文章编号：1001-3547（2017）24-0055-04 丛枝菌根真菌（Arbuscularmycorrhizalfungi，AMF）对植物具有广泛的侵染性[1]，土壤中的AMF与植物根系紧密结合，并依赖寄主植物的光合产物维持自身的生长和繁殖，同时以不同途径影响植物的代谢过程[2]。AMF在与宿主植物形成菌根会影响植物根际土壤的微生态环境，使土壤矿物质养分的存在形态及其化学有效性发生变化，进而影响到植株根系对养分含量的吸收和植株的生长。近年来，菌根效应研究己从AMF对植物营养的作用、对根系形态和代谢活性的影响、对植物生长的促进作用等方面向菌根对植物根际环境的作用和影响等方向拓展，并日益受到研究者的关注[3，4]。 本研究以番茄（LycopeiconesculentumMill.）品种苏粉11号为材料，通过在有机基质中添加丛枝菌根真菌，研究AMF对番茄幼苗生长的影响，探讨利用AMF增强有机基质的使用效果，为提高有机基质的应用效果提供试验依据。 1材料与方法 1.1试验材料 试验于2017年3～7月在淮安柴米河农业科技发展有限公司玻璃温室内进行。供试番茄品种为苏粉11号，由种子市场购得；菌根产品由捷克Symbiom院提供；育苗基质为蔬菜专用基质，由淮安柴米河农业科技发展有限公司提供。 1.2试验方法 苗期试验设2个处理，分别为基质中不添加 AMF的处理（CK）；基质中添加AMF的处理（AMF）。 将丛枝菌根真菌菌剂（颗粒）与蔬菜育苗基质混配装到50孔穴盘，每盘50g，每个处理装3盘，完全随机排列。基质装盘之前，穴盘用75%酒精擦洗消毒。 番茄种子用10%次氯酸钠溶液表面消毒5～ 10min，在55℃温水中处理15min，然后在30℃的温水中浸种8h，之后置于28℃的恒温箱中催芽，湿度80%，保持黑暗，直至发芽。待种子萌发，选取饱满、发芽整齐一致的种子播种于装有混配AMF基质的50孔穴盘中。育苗期间各处理于晴天9：00，用喷壶装清水均匀喷洒在育苗穴盘，以水刚从穴盘底部流出为宜。白天温度控制在22～28℃，夜间16～18℃，光合有效辐射（PPFD）为400～800μmol?m-2?s-1，相对湿度维持在60%～70%。待幼苗生长至30d，测定生长指标、侵染率、根际酶活和微生物数量等指标。 1.3测定指标与方法 ①形态指标和干物质株高：用直尺测定子叶节到生长点的高度（单位：cm）；茎粗：用游标卡尺测量与子叶展开方向平行的子叶节或子叶节下 0.5cm处的粗度（单位：mm）；植株用自来水洗净后用吸水纸擦干，分为地上部分和地下部分，测量鲜质量（单位：g）；植株地上部分和地下部分置于烘箱中，105℃，杀青15min，待温度降至75℃以下，烘干至恒重，测量干质量（单位：g）。 ②菌根侵染率每个处理需选取20条根段（减小因根样差异而造成的误差）；将根样经20%KOH透明、酸化（5%醋酸）后，用5%醋酸墨水染色液（派克?黑书写墨水Quink）染色，清水浸泡脱色后即可镜检。丛枝结构清晰可见，并能分辨AMF与其他未知真菌[5]。 根据根段侵染数量或程度分为0，10%，20%，30%，100%几种侵染等级，依下列公式计算该样品菌根侵染率。 侵染率（%）=∑（0%×根段数+10%×根段数+ 20%×根段数+30%×根段数+100%×根段数）/观察总根段数[6]。 ③微生物数量微生物数量采用稀释涂布平板法测定[7]。用千分之一的分析天平称取10g基质加入盛有90mL无菌水的三角瓶中，振荡10min，使基质均匀分布在溶液中，成为基质悬浮液；吸取 1mL基质悬浮液于9mL无菌水中振荡使稀释均匀，稀释成10-7～10-2浓度梯度的菌悬液。根据各类微生物在基质中数量多少选择适当浓度进行分离接种。本试验真菌采用10-3浓度，放线菌采用10-5浓度，细菌采用10-5浓度，各设3次重复。细菌菌落数用牛肉蛋白胨琼脂培养基平板计数法测定；真菌菌落数用马丁氏琼脂培养基平板计数法测定；放线菌菌落数用高氏1号琼脂培养基平板计数法测定[8]。 真菌、细菌和放线菌计数：每1g基质中菌落数量=同一稀释度3次重复的平均菌落数×稀释