酶促反应动力学-王镜岩生物化学全.ppt

抑制剂（inhibitor） :使酶的必需基因或酶的活性部位中的基团的化学性质改变而降低酶活力甚至使酶完全丧失活性的物质。 抑制作用(inhibition) :酶的必需基团化学性质的改变，但酶未变性，而引起酶活力的降低或丧失 。有选择性。 失活作用(inactivation) :使酶蛋白变性而引起酶活力丧失的作用 ,变性剂对酶的变性作用无选择性. 抑制剂；抑制作用；失活作用 抑制与失活之间关系的总结 失 活 抑 制 酶蛋白 变性 未变性 机 理 酶蛋白结构解体 必需基团性质改变 变性剂或抑制剂 无选择性 有选择性 1、抑制作用的类型 根据抑制作用是否可逆: 1、不可逆的抑制作用: 抑制剂与酶的必需基团以共价键结合而引起酶活力丧失，不能用透析、超滤等物理方法除去抑制剂而使酶复活的作用. 2、可逆的抑制作用: 抑制剂与酶以非共价键结合而引起酶活力降低或丧失，能用物理方法除去抑制剂而使酶复活，抑制作用是可逆的 v [E] 1 2 非专一性不可逆抑制剂 抑制剂作用于酶分子中的一类或几类基团，这些基团中包含了必需基团，因而引起酶失活。 类型： 实例：有机磷杀虫剂 -Ser-OH -Ser-O P O-R O-R O P O-R O-R O X 专一性不可逆抑制剂 这类抑制剂选择性很强，它只能专一性地与酶活性中心的某些基团不可逆结合，引起酶的活性丧失。 亲和标记试剂：具有底物类似的结构，可以和相应的酶结合，同时还带有一个活泼化学基团，能与酶分子中的必需基团反应进行化学修饰，从而抑制酶活性，因抑制是利用酶对底物的亲和力来对酶进行修饰标记的，故称之。 自杀性底物： 不但具有天然底物的类似结构，而且也是酶的底物，但它还有一个潜伏的反应基团，当酶对它进行催化反应时，这个潜伏的反应基团被暴露或活化，并作用于酶活性部位的必需基团或酶的辅基，使酶不可逆失活，这类抑制剂是专一性极高的不可逆抑制剂，故把这种抑制剂称为自杀性底物。 可逆抑制作用 竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制 竞争性抑制（competitive inhibition） 抑制剂化学结构与底物相似，因而与底物竞争性地与酶活性中心结合 E + P EI + I S + ES E 实例：磺胺药物的药用机理 H2N- -SO2NH2 对氨基苯磺酰胺 H2N- -COOH 对氨基苯甲酸 对氨基苯甲酸 谷氨酸 蝶呤 叶酸 非竞争性抑制（noncompetitive inhibition） 酶可以同时与底物与抑制剂结合 E + P EI + I S + ES E S + ESI（不能分解为产物） + I 反竞争性抑制: 酶只有在与底物结合后，才能与抑制剂结合 S + ES E + P E ESI（不能分解为产物） + I 竞争性抑制作用 非竞争性抑制作用 竞争性非竞争性抑制作用机理示意图 底物与酶专一性结合 2、可逆抑制作用的动力学（重点） （1）竞争性抑制的动力学特征 Vmax不变，Km增大 竞争性抑制（competitive inhibition） 抑制剂化学结构与底物相似，因而与底物竞争性地与酶活性中心结合 E + P EI + I S + ES E （1）V下降，发生抑制 （2） Vmax不变（底物浓度增大，抑制剂结合机率减小） （3） Km增大，亲和力下降 （2）非竞争性抑制的动力学特征 Vmax变小，Km不变 V= Vmax 1+ [I] Ki [S] Km+[S] 非竞争性抑制（noncompetitive inhibition） 酶可以同时与底物与抑制剂结合 E + P EI + I S + ES E S + ESI（不能分解为产物） + I （1）V下降，发生抑制 （2） Vmax减小（一部分酶始终失活） （3） Km不变，酶与底物亲和力不受影响 （3）反竞争性抑制的动力学特征 Vmax变小，Km变小 V= Vmax 1+ [I] Ki [S] Km 1+ [I] Ki +[S] 反竞争性抑制: 酶只有在与底物结合后，才能与抑制剂结合 S + ES E + P E ESI（不能分解为产物） + I 介绍：酶的抑制作用在工、农业及医学上的应用 农药设计 药物设计 四、一些重要的抑制剂 抑制剂: 使酶活性降低的物质。 抑制剂作用分可逆抑制剂与不可逆抑制剂 可逆的依据：能否用透析、超滤等物理方法除去抑制剂，使酶复活 机理：实际上是底物的类似物，专一地作用于某一种酶活性部位的必需基团而导致酶的失活， 第10章 酶促反应动力学 影响酶促反应速度的因素kinetics of enzyme—catalyzed reactions