用多聚酶链式反应扩增DN断.pptVIP

一、基础知识 （一）、PCR技术的概念 是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百份的DNA拷贝 （二）、PCR技术的应用 遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定 2、DNA合成的方向 （1）DNA单链两端的命名 后续加工：DNA聚合酶I将引物切去，并合成空缺处的DNA单链，再由DNA连接酶将不连续的DNA子链连接起来 DNA聚合酶不但能够催化磷酸二酯键的形成，还具有校对功能。它在每引入一个核苷酸后都要复查一次，只有碱基配对无误后才能继续往下聚合。 ［思考］DNA分子能准确复制的原因有哪些？ DNA双螺旋结构提供模板； 碱基互补配对； DNA聚合酶的复查功能。 3、DNA复制的前提——是______________用_________________方法 5、体外DNA复制的条件(PCR 反应的条件) ①DNA模板； ②分别与两条模板链相结合的两种引物； ③四种脱氧核苷酸； ④耐高温的聚合酶； ⑤ 控制温度，但不需解旋酶. 二、PCR的反应过程 以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率 二、PCR的反应过程 （1）变性：当温度上升到90 ℃以上时，双链DNA解聚为单链。 （2）复性：温度下降到50 ℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。 （3）延伸：温度上升到72℃左右，溶液中的四种脱氧核