2.1-细胞中的元素和化合物-实验(2018.9.16).pptVIP

（第2课时） 实验 实验: 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 实验原理： 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如： 1.还原糖 + 斐林试剂→砖红色沉淀 2.脂肪 + 苏丹Ⅲ 或（Ⅳ）染液→橘黄色（红色） 3.蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色 4.淀粉 + 碘→蓝色 还原性糖+斐林试剂→砖红色沉淀 还原性糖：葡萄糖、麦芽糖、果糖 非还原性糖：蔗糖、淀粉等 苹果和梨是比较理想的实验材料。 选择白色或近于白色的组织 斐林试剂: A液、0.1g/ml NaOH B液 、0.05g/ml CuSO4 使用方法：A、B等量混合均匀使用（现配现用） 无色 蓝色 CH2OH(CHOH)4CHO+2Cu(OH)2 CH2OH(CHOH)4COOH +Cu2O↓+2H2O 取2ml苹果的组织样液。 取1ml新配制好的斐林试剂。 取一只试管，将量好的苹果组织样液倒入试管中，然后将量好的斐林试剂倒入试管中，震荡试管使溶液混合均匀，我们可以看到此时溶液呈蓝色。 水浴加热（55-60°C） 溶液的颜色（蓝色--棕色--砖红色。 溶液的颜色从蓝色变成砖红色。 苹果中含有还原性的糖。 （１）水浴加热的温度应为50~65度 （2）斐林试剂是甲、乙两液等量混匀后立即使用，即现配现用（原因：斐林试剂不稳定，易变性）。 （3）材料选择的要求：还原性糖含量多，颜色淡，方便易取。 脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色 脂肪+苏丹Ⅳ→红色 取少量脂肪样液，加入苏丹Ⅲ，震荡，可看到溶液呈了橘黄色，本实验我们用苏丹Ⅲ做染液。 芝麻，脂肪含量丰富，但种子颗粒太小，不利于切片制作。 玉米，脂肪含量较少，种子颗粒也较小，因此也不适合做实验材料。 花生是比较理想的实验材料 我们选用花生 50%的酒精、苏丹Ⅲ、清水 （2）脂肪的鉴定 取材：花生种子浸泡3～4 h，将子叶削成薄片 观察：在低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒 然后用高倍镜观察 结论：脂肪能被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色 ①取最理想的薄片 ②在薄片上滴2～3滴苏丹Ⅲ染色 2～3 min ③去浮色（体积分数为50%的酒精） ④制成临时装片 制片 显微镜下观察到橘黄色的颗粒。 花生种子细胞中含有脂肪。 （1）检测脂肪时，切片要薄（如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰，有的地方模糊） ； （2）用苏丹Ⅲ 染色时间不宜过长； （3）需用显微镜观察. （4）酒精的作用是：洗去浮色 （5）材料选择：脂肪含量多，颜色淡，方便易取 蛋白质+双缩脲试剂→紫色络合物 豆浆、蛋清、牛奶都是很好的实验材料。 注意：蛋清稀释，如果稀释不够，反应后的产物会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底。 双缩脲试剂: A液、0.1g/ml NaOH B液 、0.01g/ml CuSO4 使用方法：先加A液1ml，再滴加B液3-4滴 （3）蛋白质的鉴定 蛋清液呈紫色。 蛋清液中含有蛋白质。 （1）双缩脲试剂是先加入A液1ml,摇匀,再加入B液4滴,摇匀（原因：主要利用碱性环境）. （2）用鸡蛋清检验蛋白质时，要将鸡蛋清高倍稀释(10倍以上)。（否则反应不彻底，与双缩脲试剂反应后凝结在试管壁上） （3）材料选择：蛋白质含量多，颜色淡，方便易取 （4）淀粉的检测与观察 化合物 试剂 现象 注意事项 还原糖 脂肪 淀粉 蛋白质 斐林试剂 苏丹Ⅲ （或苏丹Ⅳ） 碘液 双缩脲试剂 砖红色沉淀 橘黄色 （或红色） 蓝色 紫色 甲、乙液等量混合 均匀，水浴加热 显微镜观察 先加A液1ml，摇匀，后B液4滴 斐林试剂 双缩脲试剂 甲 0.1g/mL NaOH 乙 0.05g/mLCuSO4等量混合用 A 0.1g/mL NaOH B 0.01g/mLCuSO4 先A后B 实验小结