第八章氨基酸发酵机制.ppt

第八章 氨基酸发酵机制 第一节、概述 1.代谢控制发酵 遗传学的方法或其他生物化学的方法，人为的改变、控制微生物的代谢，使有用产物大量生成、积累的发酵。 条件: (1)搞清楚了微生物细胞各种氨基酸代谢的遗传控制，代谢调节机制。 (2)可人为的在DNA水平上改变微生物的代谢 (3)合理的控制环境条件 2.氨基酸发酵的种类 （1）使用野生型菌株发酵 （2）使用营养缺陷型菌株发酵 （3）使用抗类似物突变株发酵 （4）添加前体法 （5）酶法转化法 3.微生物调节控制因素： （1）酶的浓度 诱导 阻遏 （2）酶的活性 终产物的抑制或激活 辅酶水平的活性调节 酶原的活化 潜在酶的活化 4.根据代谢作用将酶分类 （1）调节酶 变构酶 同工酶 多功能酶 （2）静态酶 （3）潜在酶 关键酶：参与代谢调节的酶的总称。 5.氨基酸合成的关键酶 （1）磷酸果糖激酶 （2）柠檬酸合酶 （3）N-乙酰谷氨酸激酶 （4）鸟氨酸转氨基甲酰酶 （5）天冬氨酸激酶 （6）高丝氨酸脱氢酶 （7）苏氨酸脱水酶 （8）ａ-乙酰羟酸合成酶 （9）DNAP合成酶 （10）分支酸变位酶 （11）预苯酸脱水酶 （12）预苯酸脱氢酶 第二节、酶活性的控制 别构效应、共价修饰、寡聚酶的解聚与聚合、蛋白酶水解激活 一、变构调节 （一）变构效应（别构效应） 1.别构效应：某种不直接涉及蛋白质活性的物质，结合于蛋白质活性部位以外的其他部位（别构部位），引起蛋白质分子的构象变化，而导致蛋白质活性改变的现象。 别构酶：受别构效应调节的酶。 效应物：凡使酶发生别构效应的物质， 通常为小分子代谢物或辅助因子。 2.别构酶结构上的特点:多个亚基、有四级结构、活性中心与别构中心可处于不同的亚基或同一亚基不同的部位。 ?? 3.别构酶性质上的特点:当专一性底物与别构中心诱导楔合时，随着别构中心构象的改变，该酶的活性中心构象也会相应发生变化，从而引起酶催化活性的改变。 脱敏作用： 经特定处理后，不丧失酶活性而失去对变构效应物的敏感性，称脱敏作用。 （1）酶解聚 （2）基因突变 （1）Asp浓度增加，ATC酶与底物亲和力及协同性增加 （2）CTP反馈抑制ATC酶活性，但不能全部抑制 （3）底物浓度饱和而达到最大反应速度不受抑制剂的影响 3-磷酸甘油酸脱氢酶 3-磷酸甘油酸脱氢酶对NAD浓度的较大变化不受大的干扰。 （二）序变模型和齐变模型 调节酶总结： （1）调节酶一般为变构酶； （2）调节酶反应速度与底物浓度关系多呈S型，有协同性； （3）调节酶多处于合成代谢途径上而且一般在代谢分支点，多受终产物反馈抑制； （4）中间产物不影响调节酶的活性； （5）调节酶后面的酶对终产物不敏感； （6）有脱敏作用； （7）调节酶与负效应物非共价结合引起的变构调节，是酶活性控制的一种快速、敏感、高效的细调方式。 （三）寡聚酶的解聚和聚合 蛋白激酶调节：聚合：活性低解聚：活性高 （五）调节类型 1.单功能途径 （1）终产物抑制 （2）前体激活 （3）补偿性激活 A→B → C → D → E I F → G → H 2.多功能途径 (1)协同反馈抑制（多价反馈抑制） F → G A→B → C D → E (2)合作反馈抑制 F → G A→B → C D → E （3）积累反馈抑制 F → G A→B → C →D H → I （4）顺序反馈抑制 E → G A→B → C →D →F →G →K H → I 如：枯草芽孢杆菌等芳香族氨基酸的生物合成 。 (5)同工酶 F → G A B → C D → E (6)假反馈抑制 结构类似物引起的反馈抑制 第三节、酶合成调节 合成调节方式 1.酶的诱导 2.分解代谢物阻遏 3.终产物调节 一、操纵子学说 Trp含量较低时---