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泉 州 师 范 学 院
毕业论文(设计)
题目 三种提取剂提取菟丝子多酚的抗氧化研究
化生 学院 生物科学(食品质量与安全方向)专 业 10级
学生姓名 黄勇 学 号 101004004
指导教师 董乐 职 称 副教授
完成日期 2014-1 -5
教务处 制.
三种提取剂提取菟丝子多酚的抗氧化研究
化学与生命科学学院 生物科学(食品质量与安全方向)专业 101004004 黄勇
指导教师 董 乐 副教授
【摘要】本文采用甲醇、乙醇、丙酮三种有机溶剂在料液比1:30、超声波辅助10min、65℃ 1h条件下提取菟丝子多酚,并对提取物进行抗氧化测定、比较。通过测定羟自由基,DPPH的半清除率比较提取物的抗氧化活性,实验结果表明:60%甲醇溶液提取的提取物抗氧化作用较强
【关键词】 菟丝子、多酚、有机溶剂、抗氧化、自由基清除率。
1前言
菟丝子(Cuscuta chinensis)是旋花科、菟丝子属植物菟丝子的干燥成熟种子, 始载于《神农本草经》 , 又称菟丝实、龙须子、黄丝、黄藤子、豆寄生、吐丝子、无娘藤米米、萝湾了,维吾尔语名称为艾普提莫[ 1]。是常用的补益中药, 具有补阳益阴、固精缩尿、明目止泻的功效[ 2]。菟丝子主要含黄酮类、糖苷、氨基酸及微量元素, 还有胆甾醇、芸苔甾醇、谷甾醇、豆甾醇及三萜酸类、生物碱、香豆素、鞣酸等化学成分。菟丝子主要产于河北、陕西、山东、山西、黑龙江、江苏、新疆、吉林等地。2000 年版《中国药典》收载为旋花科植物菟丝子 Cuscutachinensis Lam. 的干燥成熟种子[ 3-4]
菟丝子及南方菟丝子为一年生缠绕性寄生草本。生于海拔 200~ 3000 m的田边, 山坡阳处、路边灌丛或海边沙丘, 通常寄生于豆科、菊科、苋科、唇形科、蒺藜科等 20多个科的近百种植物上。分布伊朗, 阿富汗向东至日本, 朝鲜, 南至斯里兰卡, 马达加斯加, 澳大利亚[ 5]。菟丝子属植物在中国大部分地区都有分布, 但种的分布则具有一定的地域性。在中朝俄边境的珲春地区, 主要是金灯藤、南方菟丝子、啤酒花菟丝子和单柱菟丝子[6]; 在云南, 主要是菟丝子、大花菟丝子和金灯藤[ 7]; 在山东, 则主要是菟丝子、南方菟丝子、金灯藤和啤酒花菟丝子[8]。目前, 菟丝子药材商品主要是菟丝子及同亚属的南方菟丝子的种子, 并以南方菟丝子较多[ 9]。全国有三大主产区, 按产量大小排序为内蒙古、宁夏、新疆; 次产区为山西、甘肃、江苏、东北。按质量排序, 内蒙古的质量最好, 次之为宁夏、新疆[ 10]。
菟丝子的药用价值非常之高,专家学者不断的发觉其功能强大,本文就菟丝子的提取物抗氧化比较深入研究菟丝子,通过对其多酚的抗氧化作用的研究更加了解它,更充分的利用这一资源,加强利用率!
2材料与方法
2.1实验材料与仪器
菟丝子:购与内蒙古赤峰市药材市场
甲醇、乙醇、丙酮、浓硫酸、酒石酸亚铁、DPPH、水杨酸、FeSO4、H2O2,所有试剂均为分析纯。
2.2实验仪器
高速粉碎机;恒温干燥箱;TDL-5000B离心机(飞鸽牌);台式天平;旋转蒸发器(上海中生科技有限公司);V-1100D可见分光光度计(上海美普达仪器有限公司);数据恒温水浴锅HH-4(国华电器有限公司);DK-80三孔电热恒温水槽(上海齐欣科学仪器有限公司);KQ-600E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);pH计;电子精密天平FA1004N,上海菁海仪器有限公司。
3 实验方法
3.1菟丝子原料的制备
将菟丝子干燥12h,粉碎、过64目筛,于冰箱中低温存放备用。
3.2 菟丝子多酚的提取
取三个洁净、干燥的锥形瓶,用电子天平称取2.000g菟丝子粉末放于锥形瓶底,按照料液比1:30分别加入60%的甲醇、乙醇、丙酮,轻微震动混匀,用保鲜膜封口放入超声波清洗器中用超声波辅助提取20min,放入水浴提取装置用65℃水浴提取1h,将水浴后的混合液体移入离心管中,天平配平后放入离心机中,设定4000r/min 提取时间10min。离心后取部分上层清液置于具塞比色管中,其余的置于锥形瓶中密封中放入冰箱保存。
3.3 菟丝子多酚含量的测定
3.3.1 没食子酸标准曲线的制作
准备8支25mL具塞试管,取没食子酸溶液标准溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7mL于编号0至9号的试管中,用蒸馏水稀释至10mL,再加入1mL福林酚试剂,混匀后再加入5mL 5%碳酸钠溶液,充分混匀,并在室温放置60min后加入蒸馏水定容至25mL,在波长为750nm下测定相应的吸光值。
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