以竹嵌纹病毒或其卫星核酸载体建立绿藻之高效率转殖系统.PDFVIP

中華民國第 52屆中小學科學展覽會 作品說明書 高中組 生物 （生命科學）科 佳作 040708 藻生貴脂 －以竹嵌紋病毒或其衛星核酸載體建 立綠藻之高效率轉殖系統 學校名稱 ：國立臺中女子高級中學 作者 ： 指導老師 ： 高二 陳盈芸 呂億真 高二 林依儒 關鍵詞 ：綠藻、電穿孔法 、衛星核酸 摘要 綠藻(Chlorella sp. strain DT)為含有大量油脂的球型單胞藻 ，容易大量培養 ，目前研 究証明以電穿孔法能獲得最佳化的轉殖效率 。而竹嵌紋病毒(Bamboo mosaic virus, BaMV) 已 成功發展為表現外源蛋白的載體 ，其衛星核酸 (satellite RNA)的載體系統則仍在發展階段 。 本實驗目的有二 第一， 為比較 BaMV及衛星核酸 (satBaMV)載體 ，以建立較高效率的轉殖系統 。 第二為延伸應用生物課程中所提到的基因轉殖技術 。實驗中利用電穿孔法將質體轉入綠藻 中 ，比較篩選抗藥性細胞數 、計算轉殖成功率 。經 PCR檢測後發現以 satBaMV為載體的轉殖 成功率較高 。未來如能成功建立完整的衛星核酸載體轉殖系統 ，可將特定基因以此系統轉殖 入綠藻以增加綠藻產油量 ，正式成為新興生質能源 ，以因應能源危機 。 1 壹 、 研究動機 報章雜誌上常常可見關於能源危機的報導 。由於人類對非再生能源的大量開採 ，全 世界面臨嚴重的能源短缺 ，科學界因此致力發展能成為其替代能源的生質能源 。目前廣 受矚目的生質能源多以糧食作物為主要原料 ，但若大量使用糧食作物反而會造成世界的 糧食危機 ，於是我們把目光轉向同為生質能源 綠藻 。綠藻可以產生大量油脂作為生質柴 油 ，而台灣四面環海的地理環境也非常 適合綠藻產業的發展 。目前綠藻產業有兩種趨 勢 ，一種是發展產油量但不易培養的綠藻 ，而另一種是發展產油量低但易培養的綠藻 ， 基於台灣的產業及地理優勢 ，我們朝向第二種綠藻研究 。然而若就目前技術發展綠藻養 殖 ，總體產油量仍不高 ，會使得相對成本過高 ，需進一步改良其 基因或 生長環境提升油 脂產量 ，以降低成本 。全世界已有許多研究正著力於此問題 ，希望能找出能有效提升油 脂產量之基因或機制 。現階段還未研發出能大量提升綠藻油脂產量的技術 ，卻又面臨了 第二個問題 ：綠藻的轉殖方式多缺乏效率和準確度 。基於研究提高油脂產量的基因需有 龐大的研究背景及研究時間 ，我們選擇改善 此產業面臨的第二個問題 ，試圖提升 綠藻的 轉殖 效率並建立一個新的系統 。 貳 、 研究目的 比較並找出效果最佳的轉殖方法 ─ (一) 以竹嵌紋病毒 (Bamboo mosaic virus ，BaMV) 為載體配合電穿孔法提升轉殖效率 。 (二) 以竹嵌紋病毒的衛星核酸 (sa