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第3章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全 精选编制 第一节 消毒灭菌的常用术语 消毒(disinfection) 利用理化因素杀死物体或环境中病原微生物的措施。并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物 灭菌(sterilization) 利用理化因素杀死物体上所有微生物的过程，包括芽胞。 精选编制 防腐(antisepsis)：体外防止或抑制细菌生长繁殖的方法 清洁（cleaning）：是指通过除去尘埃和一切污 秽以减少微生物数量的过程。 无菌(asepsis) 不存在任何活菌 无菌操作（aseptic technique)：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术 精选编制 第一节 消毒灭菌的方法 一、物理消毒灭菌法 常用的有:热力、紫外线、辐射、超声波、滤过 干燥 低温 最重要的是热力 二、化学消毒灭菌法 精选编制 热力灭菌法 （一）干热灭菌 焚烧、烧灼、 红外线 干烤（160~170℃/2h） （二）湿热灭菌 巴氏消毒法pasteurization 煮沸法 30分钟 流动蒸气灭菌法 间歇蒸气灭菌法 高压蒸气灭菌法 121℃,15个大气压,20分钟 同一温度下,湿热比干热效果好 用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物，而仍保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法。 62℃30min 或72℃ 30’sec 精选编制 2.影响湿热灭菌的因素(了解) (1)微生物因素: (2)温度与作用时间: (3)pH值的影响: (4)介质的性质: 精选编制 辐射杀菌法 1、电离辐射 X、β、γ射线 原理:通过产生OH-、O2等活性游离基进行杀菌；通过破坏DNA的结构导致菌体死亡 2、非电离辐射 （1）紫外线 200~300nm 杀菌原理：导致DNA分子构型改变，导致DNA复制出现差错 用途与缺陷 只用于空气和物品表面的消毒，用时注意防护 （2）日光 能杀死大部分的微生物 （3）微波 常用于对非金属器械的消毒 精选编制 滤过除菌法 1、贝克菲滤器 2、蔡氏滤器 3、玻璃滤器 4、膜滤器 孔径 0.22um-0.45um除菌25-100nm可去除病毒 空气过滤器:无菌棉花、活性炭及细玻璃纤维等 可对空气进行过滤除菌 精选编制 2007-5-26 * 精选编制 超声波消毒法 原理：空穴效应 精选编制 干燥与低温抑菌法 抑菌和灭菌 常用冷冻法贮藏菌种 要注意: 迅速冷冻 加入冷冻保护剂 一般-20-70度 冷冻真空干燥保存菌种 精选编制 滤器和层流室 精选编制 化学消毒灭菌法(外用) 常用消毒剂的杀菌机制 使菌体蛋白变性或凝固 干扰微生物酶系统和影响其代谢 损伤细胞壁、细胞膜 精选编制 二、化学消毒灭菌法 （一）高效消毒剂 （high-level disinfectants） 1.含氯消毒剂；2.过氧化物消毒剂； 3.醛类消毒剂；4.环氧乙烷 （二）中效消毒剂 （intermediate-level disinfectants） 1.含碘消毒剂；2.醇类消毒剂 （三）低效消毒剂 （low-level disinfectants） 1.季铵盐类；2.氯已定；3.高锰酸钾 精选编制 固体二氧化氯消毒剂 精选编制 消毒剂的主要类型及应用 重金属盐类 1%硝酸银 氧化剂 0.1% 高锰酸钾、3%过氧化氢 酚 石炭酸 醇类 70-75%的乙醇 醛类 37%-40%福尔马林 卤素类 0.2ppm-0.5ppm氯,2.0%-2.5%碘酒 酸碱类 15%-25%生石灰、50%醋酸蒸发 表面活性剂 0.1%新洁尔灭 染料菌 2%-4%龙胆紫 烷化剂 50mg/L环氧乙烷 精选编制 医学上常用消毒剂类型作用机制及种类 类别 作用机制 常用种类 酚类 蛋白变性，细胞膜损伤 石炭酸 醇类 蛋白变性 乙醇 氧化剂 氧化、蛋白沉淀 高锰酸钾、过氧乙酸、碘酒 重金属盐 氧化、蛋白酶变性 红汞、硫柳汞 表面活性剂 蛋白变性，细胞膜损伤 新洁而灭 染料 干扰氧化、抑制繁殖 龙胆紫 酸碱类 破坏膜、壁，蛋白凝固 醋酸、生石灰 烷化剂 醛类 蛋白质、核酸烷基化 与氨基结合,蛋白变性 环氧乙烷 甲醛、戊二醛 p40 精选编制 第三节 消毒灭菌的运用 （一）高危器械物品 用时需进入无菌组织 的物品。所有这些物品都应该灭菌。 （二）中危