课件：变应性鼻炎实验动物模型.ppt

* 变应性鼻炎实验动物模型的建立 概述 概念：变应性鼻炎(allergic rhinitis，AR)是机体对外界致敏原，如冷空气、粉尘、螨虫、皮毛、油烟等的敏感性增高，由IgE介导的介质（主要是组胺）释放，并有多种免疫活性细胞和细胞因子等参与的鼻黏膜非感染性炎性疾病 。属于I型变态反应。 主要症状:喷嚏、鼻痒、 流涕、鼻塞。 检查指标： IgE 组胺 P物质 病理变化 基本病理变化为毛细血管扩张，通透性增加,腺体分泌增加以及嗜酸性粒细胞浸润，缓解期可恢复正常，长期反复发作时可引起粘膜上皮层增生性改变,导致粘膜肥厚和息肉样变；若合并感染，可为粘脓涕或脓涕。 正常对照 造模组 特点：变应性鼻炎的发病率高，发病机制复杂，因此建立一种既能反应变应性鼻炎典型症状，又能反映其病理生理改变的动物模型，有助于研究工作的进一步深入和开展。 诱发性动物模型 定义：通过物理的、化学的和生物的致病因素作用于动物，造成动物组织、器官或全身一定的损害，出现某些类似人类疾病时的功能、代谢障碍或病毒使动物患相应的传染病，又如用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。 优点：能在短时间内复制出大量疾病模型，实验条件易控制，重复性好。 缺点：和自然产生的疾病模型在某方面存在差异。 可建立模型的动物种类 豚鼠 较常用的有Hartley豚鼠 小鼠 目前常用的品系有BALB／C、CBA／J和C57BIV6等 大鼠 封闭群是最常用的类型，分为Wistar大鼠、SD大鼠、Long—Erans大鼠、Brown-Norway(BN)大鼠。此外，还有近交系，突变系和杂交群。 猎狗 新西兰兔 1、豚鼠的祖先来自南美洲的安第斯山脉 2、Hartley豚鼠属于英国种 3、豚鼠对外界刺激极为敏感，对组胺极敏感，能引起支气管痉挛性哮喘，豚鼠血清中含有丰富的补体，是所有实验动物中补体含量最多的一种动物,其补体非常稳定，免疫学实验中所用补体多来源于豚鼠。 4、能耐低氧、抗缺氧 Hartley豚鼠 Hartley豚鼠： BALB/c小鼠 BALB/c小鼠： 1、1913年从美国商人Ohio获得，1979年从美国引进。 2、常用于单克隆抗体的制备和研究；免疫细胞的分化和功能测定。 Wistar大鼠： 1、被毛白色，1907年由美国Wistar研究所育成，是我国引进早、使用最广泛、数量最多的品种。 2、对疾病的抵抗力尤以呼吸道疾病的抵抗力强。自发肿瘤率较低。对性激素感受性高。 封闭群Wistar 猎狗 1、易于驯养，适应性强； 2、视力差，红绿色盲，嗅觉灵敏； 3、具有发达的血液循环和神经系统以及大体上和人相似的消化过程，在毒理方面的反应和人比较接近，内脏与人相似 猎狗 新西兰兔： 1、兔毛色纯白，体健壮，性格温顺，易于管理。 2、用途：多用于免疫学研究，家兔的最大用处是产生抗体，制备高效价和特异性强的免疫血清。其制品广泛地用于人类各类抗血清和诊断血清的研制 新西兰兔 致敏原 经典的致敏原主要是TDl和0VA TDI:甲苯-2,4-二异氰酸酯，对机体具有半抗原性，需与载体蛋白如牛血清白蛋白合，形成完全抗原才能发挥致敏作用。有毒，在滴鼻建模时与真正的变应性鼻炎有一定区别 OVA：卵清蛋白是一种具有载体活性的抗原性蛋白质，具有很强免疫原性。0VA刺激性小，致敏后能产生持久抗体，因此成为目前建立变应性鼻炎最常用的致敏原 其他致敏原：真菌，豚草花粉，蛔虫，蟑螂，尘螨等。 常用佐剂：完全福氏佐剂、不完全福氏佐剂、AI(0H)3，和百日咳杆菌等。 建模过程：分为致敏和激发两部分。 建模所需时间：由于选择造模动物不同，造模方式不同而有较大差别，由1周到4个月不等，可以根据实验安排的时间选择造模方式。 佐剂：能增强抗原表面面积，延长抗原在体内保留的时间，使抗原与淋巴细胞有充分的接触时间。 完全弗氏佐剂=不完全弗氏 佐剂+分枝杆菌 佐剂 （一）豚鼠模型的建立 激发 致敏 以TDI为致敏原 10％TDI醋酸乙酯滴鼻，1次/天，持续5天 间隔3W 重复上述步骤 用5％的TDI10μL滴鼻，隔天一次，4W 参考文献：Nakaya M, Dohi M, Okunishi K，et al．Noninvasive system for evaluating allergen—induced nasal hypersensitivity in murine allergic rhinitis．Lab Invest。2006，86：917-926． （二）大鼠模型的建立 以Wistar大鼠为实验动物，OVA为致敏原 致敏 激发 将OVA0.3mg