课件：项目四 金黄色葡萄球菌检测-革兰氏染色.ppt

* BHI肉汤 血平板，Baird-parker平板 涂片染色 观察溶血 血浆凝固酶试验 报 告 36± 1℃ 24hr 36± 1℃ 24hr 36± 1℃ 24hr 呈金黄色，有时也为白色，大而突起，圆形，不透明，表面光滑，有溶血环。 Why? 血平板鉴定-菌落形态特征 灰色到黑玉色，圆形，光滑突起，湿润，边缘常为淡色（米黄色或灰色），周围为一混浊带，在其外缘常有一透明圈。 Why? Baird-parker鉴定-菌落形态特征 革兰氏阳性菌，球形，组成葡萄状，无芽胞，无荚膜，直径约为0.5 μm～1 μm 鉴定-革兰氏染色镜检 试管法 鉴定-血浆凝固酶试验 血浆凝固酶试验：挑取、Baird-Parker 平板或血平板上可疑菌落1 个或以上，分别接种到5 mL BHI和营养琼脂小斜面，36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h。吸取1：4兔血浆0.5ml放入灭菌试管中，再加入培养后的的BHI肉汤0.5ml，振荡均匀，放在36℃±1 ℃水浴锅，每半小时观察一次，至少观察6小时。 阳性反应 阴性反应 不凝固 少量、零散凝固 明显的块状凝固 巨大块凝固 完全凝固，倒置不流动 项目四 金黄色葡萄球菌检验革兰氏染色 一、革兰氏染色步骤 涂片 热固定 初染 媒染 脱色 复染 革兰氏染色阴性 革兰氏染色阳性 菌体呈红色者为G－ 番红复染 番红复染 菌体仍呈深紫色者为G+ 乙醇(或丙酮)脱色 细菌涂片 草酸铵结晶紫初染 卢哥氏碘液媒染 二、革兰氏染色原理 G＋菌细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障 ，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留 结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。 Gˉ菌肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结 构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结 晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。 项目 革兰阳性菌 革兰阴性菌 项目 革兰阳 性菌 革兰阴 性菌 强度 厚度 肽聚糖层数 肽聚糖含量 糖类含量 坚韧 20-80nm 15-51层 占细胞壁干 重的50%-80% 约45% 较疏松 10-15nm 1-3层 占细胞壁干 重的10%-20% 15%-20% 脂类含量 磷壁酸 外膜 脂蛋白 脂多糖 1%-4% + - - - 11%-22% - + + + G+ 和G－细胞壁化学组成及结构比较 1、G+细菌的细胞壁。厚而致密，由肽聚糖和磷壁酸组成，以金黄色葡萄球菌为代表。 2、 G-细菌的细胞壁。分两层，外层为脂蛋白和脂多糖层，内层为肽聚糖层，以大肠杆菌为代表。 三、常用的染色方法 1、染色的基本原理 主要是通过细胞及细胞物质对燃料的毛细现象、渗 透、吸附等物理因素，以及各种化学反应进行的。 2、染料种类 染料按其组成成分可以分为天然染料和人工染料 染料按其电离后染料离子所带电荷的性质分为酸性染料、碱性染料、中性（复合）染料和单纯染料四大类 3、染色方法 （1）单染色法 用一种染料使微生物染色，如美蓝、孔雀绿、碱性番红、结晶紫和中性红等。 （2）复染色法 又称鉴别染色法 是用两种或两种以上染料进行染色，有协助鉴别微生物的作用。最常用的鉴别染色法为革兰氏染色法。 （3）特殊染色法 针对一些特殊情况而进行染色的方法。 后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！ 致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求 * * * * * *