局麻药布比卡因诱导卵巢癌和前列腺癌细胞凋亡及其机制研究-麻醉学专业论文.docxVIP

学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本 人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索， 可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本论文属于 保密□ ，在 年解密后适用本授权书。 不保密□。 （请在以上方框内打“√” ） 学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日 华中科技大学博士学位论文 华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 一 一 目 录 一、英文缩略词表 1 二、中文摘要 3 三、Abstract 6 四、正文 前言 12 第一部分 布比卡因对肿瘤细胞活性及耐药性的影响 引言 17 材料与方法 18 结果 24 讨论 29 参考文献 31 第二部分 布比卡因对肿瘤细胞增殖与迁移能力的影响 引言 37 材料与方法 38 结果 42 讨论 44 参考文献 46 第三部分 GSK-3β在布比卡因诱导的肿瘤细胞凋亡中的影响 引言. 50 材料与方法 51 结果54 讨论57 参考文献 59 全文小结 62 五、综述 63 六、附录 86 二 二 七、致谢 87 PAGE 10 PAGE 10 英文缩略词表及中文对照 英文缩写 英文全称 中文名称 CMI cell mediated immune 细胞免疫 GSK3β Glycogen synthase kinase3β 糖原合成酶激酶 3β DCFH-D 5-(and-6)-carboxy-2’,7’-dichlorofluorescein diacetate 2,7-二氯荧光黄双 A NAD+ nicotinamide adenine dinucleotide 乙酸盐 烟酰胺腺嘌呤二核苷 酸 PI propidium iodide 碘化丙啶 VGSC voltage gated sodium channel 电压门控钠通道 TTX tetrodotoxin 河豚毒素 ROS reactive oxygen species, 活性氧 DAPI 4,6-diamidino-2-phenylindole 二脒基苯基吲哚 DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 EMT epithelial-mesenchymal transition, 上皮-间质转化 COX2 cyclooxygenase-2, 环氧化酶-2 NKC Natural killer cell 自然杀伤细胞 IL-6 interleukin-6 白介素-6 TNF-α tumor necrosis factor-α 肿瘤坏死因子-α Tc cytotoxic T cell 细胞毒性 T 细胞 DC dendritic cell 树突状细胞 ICAM-1 Intercellular adhesion molecule-1 细胞间粘附分子-1 NMM-9 neutrophil matrix metalloproteinase-9 中性粒细胞基质金属 蛋白酶-9 IFN-γ interferon-γ 干扰素-γ HIF hypoxia-inducible factor 缺氧诱导因子 EGF epidermal growth factor 表皮生长因子 WIF-1 Wnt inhibitory factor-1 Wnt 抑制因子-1 MSC mesenchymal stem cells 间充质干细胞 VATS video-assisted thoracoscopic surgery 电视胸腔镜下切除手 术 中文摘要 第一部分 布比卡因对肿瘤细胞活性及耐药性的影响 目的：明确布比卡因是否有抑制肿瘤细胞活性的作用，并观察布比卡因处理后是否能 增加肿瘤细胞对抗肿瘤药物的敏感性。验证布比卡因的促肿瘤细胞凋亡作用是否通过 调控凋亡蛋白酶的活性。 方法：体外培养人卵巢癌细胞（SKOV-3）、前列腺癌细胞（PC-3）和正常肾小管上皮 细胞（HK-2），实验前将肿瘤细胞种植在 24 孔细胞培养板中，24 小时后细胞达到 70%-80%融合度时开始试验。实验组肿瘤细胞培养基中加入不同容积布比卡因以达到 1μM、10μM 、100μM 、1 mM 四种不同的终浓度，对照组加入相等容积的生理盐水，继 续 培 养 24h 或 72 小 时 后 用 MTT （3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromid