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葫芦素B通过抑制NF-KB信号通路诱导Ramos细胞外源性凋亡 ( CucurbitacinB induces Ramos cell exogenous apoptosis through inhibiting NF-KB signal pathway ) 姓名：丁秀丽 导师：吴雄志 单位：天津医科大学附属肿瘤医院 主要内容 研究背景 1 研究思路 2 研究内容 3 研究流程 4 创新性与可行性 5 研究背景 葫芦素是从葫芦科植物中提取的一类四环三萜类化合物，其强大的抗肿瘤作用尤其令人瞩目，有望成为一种新的有效的抗肿瘤药物。 Jian Chao Chen et al., Cucurbitacins and cucurbitane glycosides: structures and biological activities,Nat.Prod.Rep ,2005,2005,386– 396 葫芦素发现于1960s，因具有广泛的抗肿瘤活性而备受关注，但由于其较窄的治疗指数和非特异的毒副作用，其研究在随后的几十年里被停滞。 随后，基于美国NCI60抗肿瘤筛选平台的建立，葫芦素又重新吸引了研究者的目光。它的抗肿瘤活性几乎可以与紫杉类，长春新碱和鬼臼素类等植物来源的抗肿瘤药物相睥睨，是一种极具前景的新型抗肿瘤药。 Dhong Hyun Lee et al., Cucurbitacin: Ancient Compound SheddingNew Light on Cancer Treatment,TheScientificWorldJOURNAL (2010) 10, 413–418 葫芦素的抗肿瘤活性 葫芦素B 乳腺癌 肺癌 白血病，淋巴瘤 。。。 结直肠癌 前列腺癌 喉癌 脑胶质瘤 骨肉瘤 相关机制 Xiuping Chen et al., Biological activities and potential molecular targets of cucurbitacins: a focus on cancer,Anti-Cancer Drugs 2012, 23:777–787 研究思路 研究证实CuB能够通过调节STAT3, NF-KB信号通路及其下游信号分子Bcl-2,Bcl-xl, Bax, mcl-l等诱导细胞发生内源性凋亡。 但有关CuB对淋巴瘤细胞外源性凋亡通路影响的研究尚未见报道。 葫芦素B 本研究通过观察CuB作用后人淋巴瘤Ramos细胞形态、增殖、凋亡、周期、外源性凋亡相关分子的变化情况，探讨其对 Ramos细胞外源性凋亡的影响及其可能的作用机制。 理论依据 1 我们研究发现葫芦素B对Burkitt淋巴瘤Ramos细胞有明显的凋亡诱导作用。 2 通过初步实验证实其能上调NF-KB的抑制蛋白IkBa的蛋白表达。 3 我们又通过western blot实验检测，发现其主要影响外源性凋亡蛋白caspase8 。 通过查阅文献… caspase8 c-FLIP NF-KB 葫芦素能够抑制泛素蛋白酶体系统对IkBa的降解，从而抑制NF-KB信号通路。 NF-KB又恰好能上调外源性凋亡调控分子c-FLIP的表达。 c-FLIP是目前发现的唯一在DISC水平参与调节受体调亡通路的分子，它能抑制caspase8 的激活，从而抑制外源性凋亡。 由此将NF-KB与外源性凋亡联系起来 Ning Ding et al., Apoptosis Induction Through Proteasome Inhibitory Activity of Cucurbitacin D in Human T-Cell Leukemia,Cancer2011;117:2735–46 Wang Q et al. PKC delta-mediated regulation of FLIP expression in human colon cancer cells. Int J Cancer, 2006Jan 15;118(2):326-34. Ma H M, Zhou K Y, Progress in Biochemistry and Biophysics, 2006, 33(10): 932~939 信号通路如下： -a 研究内容 细胞学实验 分子生物学实验 动物实验 1.CuB对Ramos的增殖抑制作用 。 2.CuB对Ramos的凋亡诱导作用 。 3.CuB对Ramos的细胞周期阻滞作用。 Text 裸鼠移植移植瘤 免疫组化 4.CuB对IkBa，p- IkBa的蛋白表达