蛋白质组不学与分析技术课第九讲.pptVIP

蛋白质组学与分析技术（第 九 讲） 酵母双杂交技术 主要内容 酵母双杂交概念 酵母双杂交的基本原理 酵母双杂交系统的优缺点 酵母双杂交系统的应用 酵母双杂交衍生系统 酵母双杂交技术未来展望 什么是酵母双杂交？ 酵母双杂交(Yeast Two-Hybrid)，简称双杂交系统(Two-Hybrid System)，又称相互作用陷阱(InteractionTrap)，是1989年由Stanley Fields和Song等在验证两个蛋白质间相互作用的亲和力时初步建立的，并在Nature杂志上首先描述了这一系统，该系统是以酿酒酵（S.cerevisiae）为宿主，在酵母菌内研究蛋白质－蛋白质相互作用的一种分子生物学方法。酵母双杂交正成为探索蛋白质相互作用最常用和最有力的工具。 目前已被广泛地应用于真核基因的表达与调控、细胞黏合因子间的相互作用、信号传导通路以及细胞周期与分化、反式因子的鉴定与分离等诸多领域的基础研究及药物开发。 酵母双杂交的基本原理 酵母双杂交系统的建立是基于对真核生物转录起始调控的认识。转录起始需要转录激活因子的参与，而真核生物转录激活因子大多是由结构上分离、功能上独立的两个结构域组成，即DNA结合结构域(DNA binding domain,简称为DNA-BD)和转录激活结构域(transcri