高脂膳食对老年F344鼠的代谢指标、认知和神经细胞的生理机能的影响.pptxVIP

5.153高脂膳食对老年F344鼠的代谢指标、认知和神经细胞的生理机能的影响报告人 ：李明明2016.11.07结果与讨论 材料与方法前言结论3214目录前言随着年龄的增加，肥胖和2型糖尿病越来越普遍，相关的研究也很多，但是在老年动物身上这些症状同时存在的研究却很少，探究这些症状对大脑功能的影响的研究也很少。大量的研究表明代谢综合征在正常衰老过程中认知功能的下降发挥着重要的作用。虽然代谢综合征与认知功能的下降有着一些明显且相同的病变过程，如大脑胰岛素抵抗、血管疾病等，而对于外周葡萄糖或脂质代谢的改变怎样或是否影响神经功能和大脑老化，我们知道的很少。对于食物的摄取和能量的代谢中外周与大脑的联系已有大量的关注。热量限制和运动可减缓衰老和与之相关的认知功能下降。外周激素如何调节这些随年龄增加而改变的过程还不清楚。外周代谢失调对认知功能的下降或病理状态下神经的易损性有怎样或什么程度的影响也不清楚。研究目的探究高脂膳食对外周代谢的影响及是否会加剧认知功能的下降和钙依赖的后超极化。serum analysesGTT\ITT HbA1ctissue collection and weight测基准值（GTT\ITT HbA1c)第23周动物分组19周CD3周HFD第4周66只F344鼠western blottingimmunohistochemistryMWMelectrophysiologyY-CD年龄2.5-4个月 N=13-1 12Y-HFD 年龄2.5-4.0个月 N=13 13DIETS protein carbo fat CD 19.2%Kcal 67.9%13% HFD 15.2% 42.7% 42%M-CD 年龄12.5-13.5个月 N=20-3 17M-HFD年龄12.5-13.5个月 N=20-4 16食物摄取量和体重 在整个实验中测2-3次/周材料与方法31只鼠24只鼠麻醉3. MWM实验4. 电生理学实验血液收集2. GTT/ITT/血糖/血脂血液分析冰盐溶液灌注10min1. 心脏、肝脏、附睾、腹膜下脂肪垫获取并称重a 大脑取出浸于4%的多聚甲醛溶液一晚，并保在30%的蔗糖溶液于 -20℃下冷冻保存，直到免疫组织化学实验部分使用5. 蛋白免疫印迹实验6.免疫组织化学实验F344 rats材料与方法实验一：材料与方法1. 体重、食物摄取量、外周组织重量 体重与食物摄取量：在23周的实验中平均每只鼠每周测量2-3次 外周组织重量：2. GTT/ITT/血糖/血脂 葡萄糖、胰岛素、AUC GTT、AUC ITT、血脂、脂联素 血清分析： 24只鼠麻醉→血液收集→冰盐溶液灌注10min→a 大脑取出浸于4%的多聚甲醛溶液一 晚，并保在30%的蔗糖溶液于 -20℃下冷冻保存，直到免疫组织化学实验部分使用；b 心脏、肝脏、附睾、腹膜下脂肪垫获取并称重 脂联素（改善胰岛素抗性和动脉粥样硬化） 范德堡大学激素化验中心实验室检测 HbA1c（临床监控糖尿病的金标准） 测量仪器：DCA Vantage Analyzer 血清胰岛素 试剂盒：Millipore rat/mouse insulin enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kit1.体重、食物摄取量、外周组织重量Y-CD,M-CD在4-23周内体重显著增加，都具有统计学意义；HFD增加体重Y＊M。HFD仅引起M-rats食物摄取量的显著下降;年龄与饮食都对食物摄取量有影响。M-rats食物摄取量较Y-rats下降的更明显与其较低的体重增加是相一致的。实验一：结果与讨论1.体重、食物摄取量、外周组织重量组织重量/体重×100附睾脂肪和腹膜下脂肪重量因HFD显著增加，腹膜下脂肪因年龄显著增加；肝脏重量因饮食增加因年龄下降；心脏重量因饮食下降在中年和HFD组，肝脏与心脏占体重百分比的下降很有可能是因为其体重的增加实验一：结果与讨论2. 血液指标的检测结果分析B1：动物对葡萄糖摄取一段时间后的反应，HFD组比CD组稍强烈些（表现为更高的AUC)；HFD使葡萄糖代谢能力下降B2：在CD或HFD都表现为年龄较大的动物胰岛素反应↑（葡萄糖水平↓也表现为更高的AUC)这表明大龄鼠有更高的胰岛素敏感性；注：A1 、A2表示高脂膳食之前（第3周）的葡萄糖耐量实验和胰岛素耐量 实验；B1 、B2表示高脂膳食之后（第23周）的葡萄糖耐量实验和胰岛素耐量实验实验一：结果与讨论实验一：结果与讨论2. 血液指标的检测结果分析 用静态的指标检测数据评估血糖对葡萄糖与胰岛素摄取之后的动态反应（AUC)；为了补充糖代谢调节的分析，测了HbA1c，中年鼠的显著下降，