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实验七 酵母菌形态观察与死活细胞鉴别

实验七 酵母菌的形态观察 与死活细胞鉴别 目的要求 1、观察酵母菌的形态及出芽生殖方式 2、学习区分酵母菌死活细胞的方法 实验原理 酵母菌是单细胞真核微生物,其大小为常见细菌的几倍至几十倍。大多数酵母采用出芽方式进行繁殖。 美蓝是一种弱氧化剂,其氧化态呈蓝色,还原态呈无色。用美蓝对酵母细胞进行染色时,由于新陈代谢,活细胞具有较强的还原能力,可使美蓝由蓝色的氧化型转变为无色的还原型,染色后细胞呈无色。死细胞或代谢能力弱的衰老细胞其还原能力弱,染色后细胞呈蓝色。 实验材料 1. 培养2d的面包酵母斜面培养物 2. 0.1%吕氏碱性美蓝染液 实验方法 1. 滴一滴吕氏碱性美蓝染液于载玻片中央,无菌操作取酵母培养物置于染液中,混合均匀。 2. 取盖玻片,将盖玻片一端与菌液接触,缓慢将盖玻片倾斜并盖在菌液上。 3min后,镜检。观察酵母菌形态及出芽情况,并根据细胞颜色区别死活细胞。 4. 30min后,再次观察。 美蓝染液水浸片法 实验报告 绘图说明面包酵母形态特征及出芽生殖情况 绘图说明曲霉和青霉的形态特征 第1组:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,1000ml,121℃灭菌20min,P241 第2组:伊红美蓝培养基(EMB培养基):伊红美蓝琼脂22.5g, 水600ml, 121℃灭菌20min 20%乳糖水溶液120ml:24g加水120ml,115℃灭菌20min 第3组:3倍浓缩乳糖蛋白胨培养基100ml: 蛋白胨3g,氯化钠1.5g,水100ml 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液0.5ml,每管加5ml,共15管,内装倒置小管,121℃灭菌20min。 第4-5组:普通浓度乳糖蛋白胨发酵培养基700ml:P244 蛋白胨7g,氯化钠3.5g,水700ml 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1.2ml, 每管加7ml,共45管,内装倒置小管 每管加10ml,共35管,内装倒置小管,121℃灭菌20min。 第6组:固体淀粉培养基:600ml,P243 蛋白胨6g,氯化钠3g,牛肉膏3g,可溶性淀粉1.2g,水600ml,琼脂10g, 121℃灭菌20min。 第7组:明胶培养基,500ml,P243 蛋白胨5g,氯化钠2.5g,牛肉膏1.5g,明胶80g,水500ml,每管7ml, 121℃灭菌20min。 第8组:蛋白胨水培养基:250ml,p244 蛋白胨2.5g,氯化钠1.25g,水250ml,每管7ml, 121℃灭菌20min

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