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电泳技术 段天璇 一、基本理论 1. 常用公式和术语 E=U/L 电场强度(V/cm)=电压(V)/电极间距(cm) *相对迁移率 mR=蛋白质迁移距离/示踪染料迁移距离 μep=v/E =l/(tE)=lL/(tU) =q/(6πrη) (cm2/(s*V) ∵F=qE =F’=6πrηv l：蛋白质迁移距离 电泳速度 v=μepE=μepJ/K 分离度 影响电泳的环境因素 电泳速度 v=μepE= εζE/(Cη) C: 6πor 4π E pH: pI(~4-7), 缓冲溶液pH(~8-9.5), 向？极泳动 离子强度I: 0.02-0.2 电渗 温度：焦耳热 介质：孔径、制胶重复性等 2. 分类 按原理: 区带电泳, (移界电泳), 稳态电泳, 显微电泳 3. 电泳仪及附属设备 提供稳定直流电源的装置 电压、电流、电功率稳定 脉冲式 电压 常压电泳仪(600V): 净电荷和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 高压电泳仪(3kV): 载体两性电解质等电聚焦电泳和DNA测序 超高压电泳(30-50kV): 毛细管电泳 电泳槽 板状电泳槽 水平板 垂直板 管状电泳槽 *自由界面电泳槽 4.电泳的支持介质 特性（要求） 物理化学性质稳定 化学惰性 均匀 种类 5.检测-染色方法 考马斯亮蓝：常用 荧光染料：灵敏 硝酸银：灵敏 酶活性 免疫学：专一 特殊蛋白质 糖蛋白、脂蛋