控制微流控芯片电泳中的蛋白质吸附-南通大学附属医院.PDF

维普资讯 检验医学2006年第21卷第5期 LaboratoryMedicine2006，Vol21．No5 文章编号：1001-2087(2006)05-0449-04 中图分类号：R446．1 文献标识码：A 控制微流控芯片电泳中的蛋 白质吸附 丛 辉 ， 王惠民 ， 宋宏伟 ， 鞠少卿 ， 金庆辉 ， 贾春平 ， 庄贵生 ， 刘 菁 (1．南通大学附属医院医学检验中心，江苏 南通226001； 2．中国科学院上海微系统与信息技术研究所 ，上海 200050) 摘要：目的 探讨抑制微流控芯片电泳中蛋白质的吸附，以提高芯片电泳蛋白质的分离效率及重现性。方 法 以蛋白质标准品、临床尿液标本为实验对象，通过提高缓冲液的pH值 、在缓冲液中加入适当的添加剂等方 法 ，进行芯片蛋白电泳 ，并与常规琼脂糖电泳结果进行比较。结果 使用pH值 10．5硼酸缓冲液 ，转铁蛋 白连续 进样出峰时间的变异系数(CV)为5．22％；在pH值 10．5硼酸缓冲液中加入 1％的乙胺，能提高芯片电泳检测尿 液蛋白的分离度 、重现性，电泳结果与 REP全 自动电泳仪结果一致。结论 使用该方法可有效地抑制芯片泳道 壁对蛋白质的吸附，分离效率大为提高。 关键词：微流控芯片；蛋白质；乙胺 ControlofproteinadsorptioninmicrofluidicchipelectrOphOresis CONGHui，WANGHuimin，SONGHong— wei，JUShaoqing，JINQinghui，JIAChunping，ZHUANGGu~heng，LIUJing． LaboratoryMedicineCenter，Affiliated HospitdlofNantongUniversity，JiangsuNantong226001，China Abstract：Objective Toestablishamethodofcontrollingproteinadsorptioninmicrofluidicchipelectrophoresisto enhanceefficiencyandreproducibilityofproteinelectrophoresis．Methods ThestandardmodelproteinsandclinicalU— rinespecimenswereanalyzedbyimprovementofpH andintroductionofadditiveandcomparedwithgeloseelectrophore— sis．Results WiththepH10．5boratebuffer，movingtimecoemcientofvraiation(cv)oftransferrinwas5．22％．In— troductionof1％ ethylamineasadditivecouldimproveseparationefficiencyandreproducibilityofurinaryproteinelectro— phoresiswhichwasconsistentwithresultsofREP．Conclusions Proteinadsoprtiontochannelwallcouldberestrained effectivelyandseparationefficiencycouldbeimprovedwiththemethod． Keywords：Microfluidicchipelectrophoresis；Protein；Ethylamine 微全分析系统在 90年代初由Manz等 首 领域 ，目前其在 医学 中的应用主要集 中在核 先提出，主要是在临床检测过程中将不连续分析 酸 ]、氨基酸 等小分子物质的检测，而关于生 过程如样本制备、生化反应、检测等手段连续化、 物大分子物质如蛋 白质等，一般需降解为多肽再 微型化，集中到数平方厘米的芯