用定点自旋标记的方法研究天青蛋白疏水区的结构及-中国科学杂志社.PDF

用用定定点点自自旋旋标标记记的的方方法法研研究究天天青青蛋蛋白白疏疏水水区区的的结结构构及及其其与与p53蛋蛋白白的的相相互互作作用用 徐超, 殷俊 and 赵保路 Citation: 中国科学: 生命科学 41, 30 (2011); doi: 10.1360/zc2011-41-1-30 View online: http://engine. /doi/10.1360/zc2011-41-1-30 View Table of Content : http://engine. /publi her/ cp/journal/SSV/41/1 Publi hed by the 《中国科学》杂志社 Articles you may be interested in 肌营养不良蛋白的疏水区结构 Chine e Science Bulletin 37, 1439 (1992); 猪心原肌球蛋白的自旋标记研究 Science in China Serie B-Chemi try , Biological, Agricultural, Medical Earth Science (in Chine e) 18, 1059 (1988); 兔出血症病毒衣壳蛋白与次级结构蛋白的相互作用 Chine e Science Bulletin 57, 2292 (2012); FMRP与TDG蛋白的相互作用 Chine e Science Bulletin 44, 1981 (1999); 一种改进的研究蛋白质-蛋白质相互作用的平均势方法 Chine e Science Bulletin 52, 2487 (2007); 中国科学: 生命科学 2011 年 第41 卷 第1 期: 30 ~ 37 SCIENTIA SINICA Vitae SCIENCE CHINA PRESS 论 文 用定点自旋标记的方法研究天青蛋白疏水区的 结构及其与p53 蛋白的相互作用 ①② ③ ①②* 徐超 , 殷俊杰 , 赵保路 ① 中国科学院生物物理研究所, 脑与认知科学国家重点实验室, 北京 100101; ② 中国科学院研究生院, 北京 100049; ③ Center for Food Safety and Applied Nutrition, Food and Drug Administration, College Park, MD 20740, USA * 联系人, E-mail: zhaobl@ 收稿日期: 2010-04-12; 接受日期: 2010-05-25 国家自然科学基金(批准号:和国家重点基础研究发展计划(批准号: 2006CB500700)资助项目 摘要 定点自旋标记技术结合电子顺磁共振(ESR)波谱技术已成为检测蛋白质结构的有 关键词 力工具. 本文使用该方法研究了天青蛋白疏水区的结构特征及其与p53 蛋白的相互作用. 围 天青蛋白 p53 蛋白 绕天青蛋白疏水区构建了6 个突变体, 并对其进行自旋标记. 溶液中标记位点的自旋谱线表 自旋标记 明, 45 及63 位自旋探针的运动受到很大限制, 而59 及65 位的标记探针是在一个宽松的环 蛋白相互作用 境中, 运动比较自由, 而49 和 51 位的标记探针则位于疏水结构里的一个相对封闭环境中. 抗肿瘤 同时, 对自旋探针与氯化镍可接近性的检测, 得到了标记位点附近微环境的极性特征. 当天 电子顺磁共振 青蛋白与 p53 相互作用时, 标记物自旋谱线的变化证明了标记位点所处的疏水结构直接参 与了相互