甲醛固定的牛羊脑样品采集与运送方案.DOC

甲醛固定的牛羊脑样品采集与运送方案 一、材料 1.数码照相机（或数码摄像机）、采样单、复写纸和圆珠笔或铅笔 2.医用胶布（用于捆装有样品的纱布，并在其上写上样品编号） 3.电动骨锯或采样勺、骨钳、斧头 4.解剖刀、剪刀、乳胶手套 5.纱布、棉线、密封塑料桶（容积不少于5000ml） 6.固定液：即10%福尔马林（甲醛）生理盐水 氯化钠8.5g；水900ml；40%福尔马林（甲醛）100ml 二、采样步骤 （一）如果有比较典型的BSE疑似牛，则要拍照或摄像留下证据。每省至少要对20%的临床疑似牛进行拍照或摄像，并且收集临床疑似牛的其他材料如档案等。采集临床疑似牛时，采样人员还需要通过问询等方式弄清该病牛的其他情况，问询内容可以包括饲养历史、来源、流动等情况。这些证据材料必须存档和备份，运送样品时一并寄送至检测实验室。 （二）填写采样单 根据实际情况，按采样单要求认真填写。采样地点相同的样品可以登记在同一张采样单上。 （三）取样 1.电锯采样法 （1）用电锯沿两牛角根部到枕骨大孔上边缘的方向将牛颅腔打开。 （2）用手术刀将脑膜切开，骨钳打开颅腔，然后把脑神经和脑血管切断。 （3）取出整个脑组织包括大脑、小脑和脑干（间脑、中脑、脑桥和延脑）；注意千万不要把脑干损坏。 （4）将每头牛的脑组织用纱布松松地裹住(纱布容易透水)，千万不能紧，一定要松，然后将写有编号名称的医用胶布（用圆珠笔或铅笔将编号写在上面，编号：地名+序号+样品类别名，如“青岛市10号牛”）用棉线栓在纱布口处，注意不让胶布脱落。处理好后放入10-20倍体积10%福尔马林生理盐水中固定一周。注意标签编号与采样单的编号相对应。 （5）用新的福尔马林生理盐水更换旧的固定液，密封在塑料桶中，桶外贴上桶中所有牛脑的编号，以便我们处理牛脑时不开桶盖便可知桶中的牛脑情况。每个塑料桶可根据大小放置相应数量的牛脑。 2.采样勺采集法 （1）准备专用的采样勺（一把或二把便可）、医用剪刀（一把）、一次性手套、橡胶检查手套（即乳胶手套）以及其他采样用品如采样单等。 （2）戴好一次性手套和橡胶检查手套，专门登记的人员不需要戴手套。通过观察牙齿检查牛的年龄。 （3）在平整地面倒置牛头，即牛头的两角和鼻子靠地放置。 （4）在枕骨大孔处用剪刀剪开脑硬膜，目的是便于插入采样勺。然后用一个食指伸入枕骨大孔中，沿着延脑转一周，目的是切断延脑与头骨之间相连的神经和血管，以便于延脑的取出。 （5）从延脑腹侧（也即勺子从枕骨大孔的上面进入）将采样勺插入枕骨大孔中，插入时采样勺要紧贴枕骨大孔的腔壁，以避免损坏延脑组织。采样勺插入的深度约为5-7cm（采羊脑时插入深度约为4 cm），然后向上一扳勺子手柄，同时往外抠出脑组织和勺子，延脑便可完整取出。 （6）其余步骤见1中的（4）和（5）。 注：对于临床疑似牛羊，采下脑后，从脑中线一分为二，一份用于甲醛固定，另一份用于—20℃冷冻并在低温下运送至参考实验室。 3.样品的包装与运送 （1）独将采样单邮寄给检测实验室，切不可与样品一起邮寄，目的是防止采样单被污染。 （2）将固定好的牛脑放在几个大的带内盖的塑料桶中密封，注意每个牛脑都随身带有一个唯一的编号，桶外壁上也标明桶内的所有牛脑编号。运送时桶里的固定液可以不按10-20倍体积的量，而保留适当的量便可，适当的量是以浸没牛脑为准，不过运送时必须更换成新的固定液。 （3）运输时，将装有样品的塑料桶用木架子固定好，以防运输途中颠倒。 （4）在木架子外面加两张不干胶标签，一张注明样品名称、采样单位与地址及联系电话，另一张注明放置方向、小心、易碎和切勿倒置等字样。 （5）样品由专人或经航空运至检测实验室。