氨基酸组来成分析.pptVIP

第三章 氨基酸组成分析; 氨基酸是一种小分子的两性化合物，分子质量在75～ 200Da之间，其化学通式为R-CH(NH2)-COOH，在生物体 内出现的氨基酸都是L型，仅在少数微生物来源的多肽中出 现D型氨基酸。 氨基酸分析技术的发展始于1820年，由Braconnot最早 将甘氨酸从白明胶水解物中分离出来，但直到21世纪，用 化学方法或微生物方法测定氨基酸，仍是一项持续数周或数 月的繁琐的工作。 色谱技术的引入为氨基酸分析打开了一扇新的大门。 1941年，Martin等运用色层法分析氨基酸，主要采用乙酰 化氨基酸在硅胶柱上或滤纸上半定量；随后，Moore、 Stein应用离子交换柱直接分离游离的氨基酸，在1958年， Spackman、Stein、Moore制造了自动化的氨基酸分析 仪，使氨基酸定量分析进入了一个崭新的阶段，至今仍是 经典的方法。;第一节 氨基酸组成分析的目的;第二节 蛋白质的水解方法; 影响氨基酸分析结果的三大因素是：水解、衍生、色谱。 水解是第一步，水解的完全与否对结果影响很大。在实验中 通常采用一些标准蛋白质，如细胞色素c(Cyt c)、核糖核酸 酶(RNase)或胰岛素(insulin)为标样进行水解、衍生和色 谱分析来计算回收，从而考验蛋白质分析的可靠程度和评价 方法的适用性。 但由于各种蛋门质含有的氨基酸多