一种从口腔拭子中提取DNA的简易方法.DOCVIP

200910121 技术方法 一种从口腔拭子中提取DNA的简易方法 杨建强1，徐生新2 （313000 浙江 湖州，浙江省湖州师范学院医学院1；230032合肥，安徽医科大学皮肤病研究所2） 【摘 要】 目的 应用简便方法提取口腔拭子中DNA，并用特异引物扩增，评估该方法的应用价值。方法 用1×PCR缓冲液、MgCl2及蛋白酶K混合裂解液在PCR仪上对口腔拭子进行消化，并以该产物为模板，应用角蛋白5基因1号外显子及1号染色体上2个微卫星标记特异性引物扩增，目的片段分别用于测序和毛细管电泳。结果 通过上述方法可获得用于PCR反应及后续基因测序及微卫星标记毛细管电泳分型的足量DNA。结论 利用PCR缓冲液、MgCl2及蛋白酶K混合裂解液从口腔拭子中提取DNA是一种简单、高效、快速、低成本的方法，更是一种无创的采样方法。 【关键词】 口腔拭子；角质形成细胞；口腔上皮细胞 【中图法分类号】 【文献标志码】 B 通信作者：杨建强，电话：（0572）2321539 ，E-mail： HYPERLINK mailto:yjq@hutc.zj.cn yjq@hutc.zj.cn 口腔粘膜为复层鳞状上皮，具有代谢旺盛、更新快、易脱落的特点。它由多层细胞组成，基底层具有旺盛分裂能力，其上皮脱落细胞虽然细胞核固缩，但与其他组织细胞一样具有完整的基因组DNA，从而成为法医学和遗传学DNA多态性检测分型的生物性检材 ADDIN EN.CITE EndNoteCiteAuthor张越/AuthorYear2005/YearRecNum43/RecNumrecordrec-number43/rec-numberforeign-keyskey app=EN db-id=9d9f0wsf9e5ttpertwovddp7tvsrd5fvswtt43/key/foreign-keysref-type name=Journal Article17/ref-typecontributorsauthorsauthorstyle face=normal font=default charset=134 size=100%张越/style/authorauthorstyle face=normal font=default charset=134 size=100%梅善宗/style/author/authors/contributorstitlestitlestyle face=normal font=default charset=134 size=100%微量口腔粘膜脱落细胞检材/stylestyle face=normal font=default size=100%STR /stylestyle face=normal font=default charset=134 size=100%位点的法医学检测分型/style/titlesecondary-titlestyle face=normal font=default charset=134 size=100%皖南医学院学报/style/secondary-title/titlesperiodicalfull-title皖南医学院学报/full-title/periodicalpages74-76/pagesvolume24/volumenumber1/numbersection74/sectiondatesyear2005/year/datesurls/urls/record/Cite/EndNote[1]，既往多采用酚氯仿法或Chelex-100等方法，存在酚、氯仿污染或收获率低，纯度不高等缺点 ADDIN EN.CITE EndNoteCiteAuthor朱晔一/AuthorYear2007/YearRecNum31/RecNumrecordrec-number31/rec-numberforeign-keyskey app=EN db-id=9d9f0wsf9e5ttpertwovddp7tvsrd5fvswtt31/key/foreign-keysref-type name=Journal Article17/ref-typecontributorsauthorsauthor朱晔一,/authorauthor刘启昆,/authorauthor闫鹏荣,/authorauthor邵敏华,/authorauthor卢大儒,/authorauthor钱吉,/author/authors/contributorsauth-address复旦大学生命科学学院,复旦大