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- 2019-03-01 发布于福建
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实验一??蛋白质和氨基酸的呈色反应 ;一、实验目的;(一)双缩脲反应1、原理??
?
一切蛋白质或二肽以上的多肽都有双缩脲反应,但有双缩脲反应的物质不一定都是蛋白质或多肽。
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2、试剂(1)尿素(2)10%氢氧化钠溶液(3)1%硫酸铜溶液(4)2%卵清蛋白溶液
3、操作(1) 取少量尿素结晶,放在干燥试管中。用微火加热使尿素熔化,尿素放出氨 。熔化的尿素开始硬化时,停止加热,形成双缩脲。冷后,加10%氢氧化钠溶液约1ml,振荡混匀,再加1%硫酸铜溶液1滴,再振荡。观察出现的粉红颜色。添加要避免过量硫酸铜,否则,生成的蓝色氢氧化铜能掩盖粉红色。
(2)向另一试管加卵清蛋白溶液约1ml和10%氢氧化钠溶液约2ml,摇匀,再加1%硫酸铜溶液2滴,随加随摇。观察紫玫瑰色的出现。;;2、试剂(1)蛋白质??液?(新鲜蛋清:水=1:9)?100ml
(2)0.5%甘氨酸溶液(3)0.1%茚三酮水溶液(4)0.1%茚三酮-乙醇溶液
3、操作(1)取2支试管分别加入蛋白质溶液和甘氨酸溶液1ml,再各加0.5ml 0.1%茚三酮水溶液,混匀,在沸水浴中加热1~2分钟,观察颜色由粉色变紫色再变蓝。(2)在一小块滤纸上滴一滴0.5%甘氨酸溶液,风干后,再在原处滴一滴0.1%茚三酮乙醇溶液,在微火旁烘干显色,观察紫红色斑点的出现。;;2、试
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