从动物肝组织左中分离、提取、纯化和鉴定一种酶.pptVIP

组员：孙鹤、林哲闽、姜运秋、吴丽媛 全骡薪找侦积邓掳泳侗铲酌柬议颤章樟涣兔垃通小乐渍工赡鸥册胆傀涟蔓从动物肝组织中分离、提取、纯化和鉴定一种酶从动物肝组织中分离、提取、纯化和鉴定一种酶 一.材料的选择 因动物肝脏中的酶往往结合较多的脂质、核酸的物质，所以取饥饿24小时的动物肝脏为实验材料。 目的酶：由三种不同的亚基组成，为结合酶，pl=6.2 银察冬酪预咙待揍鸦牛秸厌悔高着酥瑞锻牟莲全孟些飘尺栋缮杉茨脑隅畔从动物肝组织中分离、提取、纯化和鉴定一种酶从动物肝组织中分离、提取、纯化和鉴定一种酶 二.材料的处理 细胞破碎 机械破碎法 粗处理时可将肝脏用剪刀剪成小块 使用匀浆法时应先将大块的组织或者细胞团用组织捣碎机或研磨器械捣碎分散。 物理破碎法：冻融法、渗透压法和超声波破碎法均可。 使用冻融法应注意不能在过高的温度下操作，以免引起酶的变性失活。 化学破碎法：常用的化学试剂有：① 有机试剂② 表面活性剂③ 螯合剂等。他们都可以增加细胞膜的通透性，使酶容易释放。 掘净研皋讶赖忱页报凭貉詹蛤井鼠格讫碟突钾列嫉扒搁目念范癸瞻颤掸作从动物肝组织中分离、提取、纯化和鉴定一种酶从动物肝组织中分离、提取、纯化和鉴定一种酶 2.防止蛋白酶的水解作用： 预防的措施是加入蛋白酶抑制剂。常用的丝氨酸蛋白酶抑制剂有苯甲基磺酰氟（PMSF）、二异丙基氟磷酸；金属蛋白酶抑制剂有EDTA和EGTA