水稻缟叶枯病毒侦测技术之发展1.PDFVIP

臺中區農業改良場研究彙報64:1-11 (1999) 水稻縞葉枯病毒偵測技術之發展 1 陳慶忠 趙佳鴻 2 摘 要 應用酵素聯結法、組織轉漬法及西方浸漬法等技術偵測感染水稻縞葉枯病毒(RSV) 之水稻組織及媒介昆蟲斑飛蝨之帶毒情形。利用夾層免疫酵素聯結法(DAS ELISA)及間 接免疫酵素聯結法，縞葉枯病毒抗血清稀釋至32768 倍，純化鞘蛋白及粗汁液抗原分別稀 -5 -6 釋至 及 均能產生專一性免疫反應。以 分析吸毒後且完成潛伏期之斑飛 10 10 DAS ELISA 蝨帶毒蟲其A405讀值介於0.754~1.301間，未吸毒對照蟲則為0.021~0.069 。西方墨點法偵 測吸毒後個別斑飛蝨，帶毒蟲在 純化鞘蛋白 相同位置產生專一性免疫反應。 RSV (34.7 K) 以組織轉漬法在硝化纖維膜擠壓罹病水稻根、莖、葉或斑飛蝨蟲體後，處理RSV 多元抗 體及山羊白兔膽鹼酵素均能產生紫色反應，健康對照則無反應。試驗中斑飛蝨蟲體組織 擠壓後會粘附於硝化纖維膜上而產生非專一性反應，造成對帶毒蟲個體判定之困擾。 關鍵字：水稻縞葉枯病毒、媒介昆虫、血清偵測技術。 前 言 水稻縞葉枯病(rice stripe disease)於1984~1987年間曾在台灣大肆發生，1985年全省累計 發生面積達 公頃，目前發生面積減少， 及 年全省累計發生面積分別為 及 18,744 1997 1998 627 415 公頃(2) 。雖然發生面積及發病程度減少輕 ，但在經常發病地區，本病仍為一期稻作早 ( ) 植稻之偶發性流行病害，其發生動向仍值得密切注意。 水稻縞葉枯病毒(rice stripe virus, RSV) 為Tenuivirus屬之代表種(type species)(10,18) 。該屬 TAO 病毒僅能感染禾本科植物，目前正式被國際病毒命名委員會(International Committee on Taxonomy of Virus, ICTV)認定為種(species)之病毒除RSV 外，尚有玉米條紋病毒(maize stripe 、水稻草狀矮化病毒 、 及 virus) (rice grassy stunt virus) rice hoja blanca virus rice hoja blanca 等(10,18,21) 。陰染純化之 核蛋白 呈螺旋狀 構造，為環狀、彎曲或 virus RSV (nucleoprotein) (helix) 分枝狀之線 絲狀顆粒 ，直徑約 ，長度 (3,4) 。 ( ) (filamentous particles) 11~12 nm 100~600