大肠杆菌TdcC、SstT和LIV-1系统缺失对胞外.PDFVIP

微生物学通报 Jan. 20, 2017, 44(1): 20−29 Microbiology China /wswxtbcn tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.160101 研究报告 大肠杆菌 TdcC、SstT 和 LIV-1 系统缺失对胞外 L-苏氨酸积累的影响 杨冬美 1,2 李华 1,2 李由然 1,2 张梁 1,2 丁重阳 1,2 李赢 1,2 顾正华 1,2 石贵阳 1,2* (1. 214122) (2. 214122) 摘 要：【目的】比较分析苏氨酸吸收系统TdcC 、SstT 和 LIV-1 缺失对大肠杆菌吸收和积累胞 外苏氨酸的影响。【方法】从菌株E. coli W3110 出发，敲除tdcC 、sstT 和 livJ 基因，构建 TdcC 、 SstT 和 LIV-1 系统单缺失和多缺失菌株，将过量表达苏氨酸操纵子基因的重组质粒 pKKthrAC1034TBC 分别转入原始菌和重组菌，考察各菌株吸收和积累胞外苏氨酸的能力。【结果】 敲除 tdcC 和 sstT 基因的重组菌 T04 的苏氨酸吸收能力比原始菌 W3110 降低了 43.28% ，T04 (pKKthrAC1034TBC)胞外苏氨酸积累量最高达到 1.09 g/L，比对照菌W3110(pKKthrAC1034TBC) 高 出 172.5%。敲除 tdcC 、sstT 和 livJ 基因的重组菌 T07 的苏氨酸吸收能力比 T04 降低了 12.97%， 然而 T07(pKKthrAC1034TBC)胞外苏氨酸积累量最大为 0.63 g/L ，与 T04(pKKthrAC1034TBC)相比 降低了 42.2% 。【结论】阻断TdcC 和 SstT 系统，能有效降低大肠杆菌吸收苏氨酸的能力，提 高苏氨酸的胞外积累量。阻断LIV-1 系统，虽然能减少大肠杆菌对苏氨酸的吸收，却不利于菌 株积累胞外苏氨酸。 关键词：L-苏氨酸，大肠杆菌，吸收系统，基因敲除 Effects of TdcCSstT and LIV-1 systems deletion of Escherichia coli on extracellular L-threonine accumulation YANG Dong-Mei1,2 LI Hua 1,2 LI You-Ran1,2 ZHANG Liang 1,2 DING Zhong-Yang 1,2 LI Ying1,2 GU Zheng-Hua 1,2 SHI Gui-Yang1,2* (1. National Engineering Laboratory for Cereal Fermentation Technology, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China) (2. School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China) Abstract: [Objective] The effects of the threonine absorption system deletion, containing TdcC, SstT and LIV-1, on the extracellular accumulation of threonine were investigated in Escherichia coli . [Methods] In this paper