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人体血型鉴定与交叉配血? 实验原理 血型就是红细胞膜上特异抗原(凝集原)的类型。在血型系统中最重要的是ABO血型系统，其次是Rh血型系统。在ABO血型系统中，根据红细胞上是否含有A、B凝集原而分为A、B、AB和O型。血清中含有凝集素，且A凝集原只能与抗A凝集素结合，B凝集原只能与抗B凝集素结合，血型鉴定即是将受试者的红细胞加入标准A型血清（抗B血清）及标准B型血清（抗A血清）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞上凝集原的类型。Rh阳性和阴性通常以红细胞上是否含有D抗原来判断，含D抗原则为Rh阳性，大部分人为Rh阳性，极少数人为Rh阴性。 交叉配血实验是将供血者的红细胞和血清分别和受血者的血清（主侧）和红细胞（次测）混合，观察有无凝集现象。交叉配血是输血前的必需步骤，应坚持同型输血、交叉配血的原则。其目的，一是鉴定所测血型是否正确；二是观察是否还有其他不能输血的因素存在，以确保安全输血。 实验目的 掌握ABO、Rh血型鉴定和交叉配血的原理和方法 实验对象 人（学生自愿者）。 实验器材和药品 显微镜、离心机、采血针、双凹玻片片、滴管、1ml吸管、小试管、试管架、牙签、消毒注射器及针头；标准A、B型血清、抗D血清、生理盐水、75%酒精、碘酒、棉球、消毒棉签。 实验步骤和观察项目 一、ABO血型鉴定： （一）玻片法 1.用75%酒精棉球消毒左手无名指端，用消毒采血针刺破皮肤、用吸管吸一滴血于盛有1ml生理盐水的小试管中，混匀之城红细胞悬液； 2.取一双凹载玻片，在左上角写A字，右上角写B字，将一滴标准A型（抗B）血清滴在右侧凹内，一滴标准B型（抗A）血清滴在左侧凹内，滴管切勿混用； 3.用滴管吸取红细胞悬液，分别滴一滴于载玻片两侧的血清上，注意不要使滴管尖端与血清接触，用牙签两端分别混匀； 4.10—30分钟后用肉眼观察有无凝集现象。根据下表鉴定结果 凝 集 现 象 标准A型（抗B）血清 标准B型（抗A）血清 被检者血型 - + A型 + - B型 + + AB型 - - O型 玻片法鉴定ABO血型（+ 有凝聚，- 未凝聚） （二）试管法 1.取试管2只，分别标明A，B字样，分别加入相应标准血清2滴，各管加入受试者的红细胞悬液1~2滴摇匀； 2.将上述二试管用1000转/分离心1min； 3.取出小试管，轻弹底部，如沉淀物呈团块状浮起为凝集，呈散在烟雾状上浮进而恢复原混悬状为无凝集。 二 Rh血型鉴定（盐水介质法） （一）试管法? 1.取小 HYPERLINK /wiki/%E8%AF%95%E7%AE%A1 \o 试管 \t _blank 试管3支，1支注明抗D，另1支注明阳性对照，最后1支注明阴性对照； 2.将室温 HYPERLINK /wiki/%E7%9B%90%E6%B0%B4 \o 盐水 盐水反应活性的抗D血清各1滴加入上述试管内； 3.抗D试管中加入1滴5％待检者红细胞(盐水、血清)悬液，阳性对照及阴性对照试管中分别加入相应的阳性红细胞及阴性红细胞悬液1滴； 4.轻轻混匀，于3000r/min离心15s； 5.取出轻轻摆动观察有无凝集。 (二)玻片法? 1.取三凹玻片1块，在左侧注明抗D，中间段注明阴性对照，右侧注明阳性对照； 2.将室温盐水反应的抗D血清各1滴加入上述小格内； 3.抗D小凹内加入待检者5％红细胞悬液1滴，阳性对照内加入阳性对照 HYPERLINK /wiki/%E7%BA%A2%E7%BB%86%E8%83%9E \o 红细胞 红细胞悬液1滴，阴性对照加入阴性对照红细胞悬液1滴； 4.用干净玻棒搅拌红细胞悬液和试剂血清充分混合； 5.连续轻轻倾斜转动平板，一般在2min内观察有无凝集，或按试剂说明书规定的时间观察结果。 三 交叉配血： 1. 以碘酒、酒精消毒皮肤后，用消毒的干燥注射器抽取供血者静脉血2ml，取1滴加入盛有生理盐水1ml的小试管中，制成红细胞悬液；其余血液装入另一小试管中，待其凝固后离心分离血清；在试管上分别注明“供红”和“供清”。 2.同法制成受血者的红细胞悬液及血清，分别注明“受红”和“受清”。 3.取一双凹载玻片，在左上角写“供红受清”，右上角写“供清受红”。分别用滴管吸取“供红”、“受清”各1滴于左侧凹内，再分别用滴管吸取“供清”、“受红”各1滴于右侧凹内，用牙签两端分别混匀。 4.10—