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第40卷第10期
贵 阳 医 学 院 学报 V01．40No．10
2015年10月 OF 2015．10
JOURNALGUIYANGMEDICALCOLLEGE
爿：
黄桢钧，刘 彬，刘本荣，刘少军
(广州心血管疾病研究所广州医科大学附属第二医院心内科，广东广kl’l510260)
[摘
000
霉素(50、100、200、500、1nmol／L)处理人胚肾细胞(HEK293)，蛋白印迹法检测不同浓度雷帕霉索组中自噬
HEK293细胞，雷帕霉素(200nmol／L)处理3h，采用荧光显微镜统计，并比较两种方法转染后HEK293细胞内
系，更能全面完整地反映细胞自噬水平，能够反映细胞内自噬流的变化，是自噬定量分析的可靠方法。
[关键词]雷帕霉素；自噬；人胚肾细胞；LC3；单荧光GFP—LC3质粒；双荧光mRFP—eGFP—LC3
[中图分类号]R34—33[文献标识码]A[文章编号]1000．2707(2015)10．1029-04
theEffectofDual-FluorescencemRFP·-eGFP-LC3in
Evaluating Autophagy
HUANG Bin，LIUBenrong，LIUShaojun
Zhenjun，LIU
InstituteCardiovascularSecond
(Departmentof of D蠡ease，theAffiliated
Cardiology，Guangzhou Hospital
Medical
ofGuangzhouUniversity，Guangzhou510260，Guangdong，China)
the of
effectdual—fluorescence
[Abstract]Objective：To
investigate
were with 000
cells treated nmoVL)
autophagy．Methods：HEK293rapamycin(50，100，200，500，1
for3handthen Westernblottotestthe ofLC3 andratioofLC3一IL／LC3-I．
adopting expressionprotein
Mono．fluorescenceGFP—LC3anddual．fluorescencemRFP—eGFP—LC3transfectedHEK293cells．24h
3
afterthe cellsweretreatedwith anadditional
transfection．the rapamycin(200nmoL／L)for h．then
fluorescenc
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