新机体免疫功能检测.pptVIP

（二）细胞因子检测 （一）生物学方法 原理：根据不同细胞因子生物学活性（功能)不同而设计的方法 如IL-2可促进T淋巴细胞生长； TNF可杀肿瘤细胞； CSF可刺激造血细胞形成集落； IFN可保护细胞免受病毒攻击。 具体方法： 细胞增殖法 靶细胞杀伤法 诱导的产物分析法 细胞病变抑制法 所用抗原：OT 或 PPD 以OT为例： OT 1:2000 0.1ml 皮内注射，48—72h 观察结果。 红肿硬结直径大于 0.5cm，为阳性 作用及意义： a.是B细胞的表面标志 b.是B细胞识别抗原的受体 c.检测外周血淋巴细胞时，表面有SmIg者为 B细胞，故可作为检测B细胞数量的方法。 （2）同位素掺入法（ 3H-TdR掺入法） 原理： T细胞受PHA刺激后，细胞进入增殖周期,发生有丝分裂合成DNA。试验中当细胞进入S期时，在培养液中加入3H-胸腺嘧啶核苷（3H-TdR)，细胞摄入，合成DNA,根据掺入细胞内的同位素量，推测细胞增殖程度，从而判断T淋巴细胞转化程度。 步骤： 外周血 分离 淋巴细胞 洗涤3次 计数并配成1×106/ml 0.1ml细胞+1640 0.1ml+PHA0.5mg/ml 37 °C 54-56h 5%co2 加3H-TdR 1μci/孔 37 °C 16-18h 5%co2 收集细胞