三重实时荧光PCR相对定量法快速诊断21三体及-第三军医大学学报.DOC

请精减全文，压缩全文至4000个字符数内。控制在此排版格式下最多2.5个页面，2个页面最好。 三重实时荧光PCR相对定量法快速诊断21三体及脆性X综合征 刘彦慧1，周万军2，吴亚敏3，黎丽芬3，李超强3（523110 广东 东莞，中山大学附属东莞东华医院医学遗传学实验室1，510515 广州，南方医科大学基础医学院遗传学教研室2）问题1：3是什么单位？ [摘要] 目的 建立三重TaqMan实时荧光PCR技术方法，检测21、X染色体非整倍体。方法 以21号染色体唐氏综合征特异区域（DSCR3）为21号染色体目的基因，选取X染色体1113K一段DNA序列作为X染色的目的基因，同时选择12 号染色体上的磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH) 为参照基因，设计合成3对引物以及分别以不同荧光标记的TaqMan探针，在同一反应管中进行扩增，以相对定量ΔCt值鉴别21号和X染色体非整倍体。并进行PCR反应体系优化以及优化后参数设定和扩增效率等指标的评价，采用建立的技术检测临床标本并进行评价。结果 通过优化，目的基因和参照基因扩增效率基本一致，接近100%，模板量在100～600 ng g（问题2：请核实是笔误吗？正文中还有一处。）/μl时3个基因都可以得到有效扩增。采用上述体系检测24例正常标本和20例异常标本(包括血液和羊水标本)，正常标本的21号ΔCt值均为2，而唐氏综合症患者均为3；正常男性