基因工程菌发酵制药工艺.pptVIP

现代生物技术制药工艺 赵广荣grzhao@tju.edu.cn 现代生物技术制药工艺 生物技术制药概论 基因工程菌发酵制药工艺 动物细胞培养制药工艺 重组蛋白质药物分离、检测与质量控制 6.2 基因工程技术 概念：无性繁殖生成的遗传均一的生物群体。 个体克隆：植物细胞培养形成完整的植株，动物胚胎/体细胞的核移植，发育形成个体。 细胞克隆：由一个细胞生成一群细胞即细胞群。 基因克隆：由少量（单拷贝）基因扩增产生大量（高拷贝）基因。分子克隆 策略：化学合成－已知序列（60－80bp）;生物合成（基因扩增）(已知部分或全部序列)；文库筛选 应用：测序，功能研究，诊断与检测，物质生产… PCR原理与技术 1、原理 1971年，Kleppe等首先描述了基因合成的基本原理 PCR技术发明人： Kary Mullis（Cetus公司） 1983年，构想DNA链的合成。 1985年，Klenow片段扩增出哺乳动物单拷贝基因 1993年，获得诺贝尔化学奖。 聚合酶链式反应：Polymerase chain reaction，PCR 分子生物学技术，生物体外进行，扩增DNA片段。 通常不超过10kb,特定方法扩增40kb左右。 3、操作过程 PCR反应的基本组分： DNA模板：含靶基因的DNA片段 引物：1对人工合成的短寡核苷酸，18－25nt， 决定扩增的起始和