琼脂糖凝胶的制备琼脂糖凝胶液的制备称取08g琼脂糖.PPT

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琼脂糖凝胶电泳检测DNA * * 电泳仪,电泳槽,紫外透射仪,凝胶成像仪,一次性塑料手套等 1、仪器设备 2、琼脂糖凝胶的制备 琼脂糖凝胶液的制备:称取0.8g琼脂糖,置于三角瓶中,加入100ml TBE或TAE工作液,瓶口倒扣一个小烧杯,将该三角瓶置于微波炉加直至琼脂溶解。 3、胶板的制备 取有机玻璃内槽,洗净、晾干;将有机玻璃内槽置于一水平位置模具上,放好梳子。 将冷却至65℃左右的琼脂糖凝胶液,小心地倒在有机玻璃内槽上,控制灌胶速度和量,使胶液缓慢地展开,直到在整个有机玻璃板表面形成均匀的胶层。 室温下静置30min左右,待凝固完全后,轻轻拔出梳子,在胶板上即形成相互隔开的上样孔。制好胶后将铺胶的有机玻璃内槽放在含有0.5-1×TAE(Tris-乙酸) 或TBE(Tris-硼酸)工作液的电泳槽中使用。 4、加样 用微量加样器将上述样品分别加入胶板的样品孔内。每加完一个样品,换一个加样头。加样时应防止碰坏样品孔周围的凝胶面以及穿透凝胶底部,本实验样品孔容量约15~20 ?l。 DNA Marker: 在第一个上样孔或最后一个上样孔内加入6?l 的 1 kb DNA ladder(50ng/?l ),或DL2000 5、电泳(带上手套操作) 加完样后的凝胶板即可通电进行电泳; 建议在80~100V的电压下电泳; 当溴酚兰移动到距离胶板下沿约1cm处停止电泳; 将凝胶放入溴化乙

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