产表面活性素和伊枯草菌素A菌株的筛选及其脂肽类产物的.PDFVIP

微生物学通报 OCT 20, 2011, 38(10):1488−1498 Microbiology China © 2011 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究报告 产表面活性素和伊枯草菌素 A 菌株的筛选及 其脂肽类产物的特性 * 朱震 罗毅 张鹏 杨兴明 冉炜 沈其荣 (南京农业大学 资源与环境科学学院江苏省固体有机废弃物资源化高技术研究重点实验室 江苏 南京 210095) 摘 要: 采用血琼脂平板法, 从菜园土壤中分离到 8 株代谢表面活性剂的菌株, 比较各菌株的排 油性、抑菌性, 根据合成脂肽类物质表面活性素(Surfactin)和伊枯草菌素A (Iturin A) 必需的sfp 、 ituD 和lpa- 14 基因设计引物, 结合PCR 的方法筛选到一株具广谱抗菌性且含有sfp 、ituD 和lpa- 14 3 个关键基因的细菌XZ-173 。经过生理生化试验测定和16S rDNA 序列系统发育学分析, 将其鉴 定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) 。通过红外光谱(FT-IR)分析该菌株代谢产物, 初步 鉴定为脂肽类物质, 并对照高效液相色谱(HPLC)与标准品比对结果, 确定含有Surfactin 和Iturin A 组分。该菌株产生的脂肽粗品能使纯水的表面张力降低至 26.6 mN/m, 临界胶束浓度(CMC) 为 500 mg/L, 具有很好的乳化性能, 对立枯丝核菌和青枯菌表现出很好的拮抗活性。因此, 产脂 肽细菌XZ-173 是一株应用前景广阔的功能菌。 关键词: 芽孢杆菌, 脂肽, 表面活性素, 伊枯草菌素A, 植物病原菌 Screening a surfactin and iturin A producing strain and characterization of its lipopeptide products ZHU Zhen LUO Yi ZHANG Peng YANG Xing-Ming RAN Wei* SHEN Qi-Rong (College of Resources and Environmental Sciences, Jiangsu Key Laboratory for So ild Organic Waste Utilization, Nanjing Agricultural University , Nanjing, Jiangsu 210095, China) Abstract: After preliminarily isolated from soil of vegetable gardens by using blood-agar method, eight strains were further examined by oil-spreading test and inhibitory test. Primers were designed according to genes (sfp, ituD, lpa- 14) related to surfactin and itur