常用固定液的配制.docVIP

常用固定液的配制 1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA) 50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精，可防止材料收缩。若材料坚硬，可略减冰醋酸，略增福尔马林。若材料易收缩，可稍增加冰醋酸。久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。此液又可作保存液。固定时间最多10h。如果用在植物胚胎的材料上，改用下面的配方，效果较好：50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml 2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液（FPA） 福尔马林5ml + 丙酸5ml + 70%酒精90ml固定一般的植物组织，通常固定8~24h，可长久保存。 3. 酒精-醋酸-氯仿固定液（卡诺固定液，Carnoy fixative） 配方Ⅰ：纯酒精3份 + 乙酸1份配方Ⅱ：纯酒精6份 +乙酸1份 + 氯仿3份 配方Ⅲ：甲醇6份 +乙酸1份 + 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料，为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。固定时间不宜过久。 4. 酒精-福尔马林固定液 福尔马林2~6（6~10）ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织，尤其适用于萌发的花粉管的固定。通常固定24h，亦可长久保存。 5. 酒精-福尔马林-甘油固定液 95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。 6. 铬酸-醋酸固定液 根据固定对象的不同，可分为强、中、弱3种配方：（1）弱液配方：10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml（2）中液配方：10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml（3）强液配方：10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料，如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。固定时间较短，一般为数小时，最长可固定12~24h，但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。中液配方用于固定根尖、茎尖、未成熟子房和胚珠等。为了易于渗透，可在此液中加入2%的麦芽糖或尿素。固定时间12~24h。强液配方用于固定木质根、茎、成熟子房等。为了易于渗透，可在此液中加入2%的麦芽糖或尿素。固定时间12~24h或更长。 7. 铬酸-醋酸-福尔马林混合液 这3种药品混合在一起所配成的各种固定液，通常称纳瓦申固定液（Nawashin fixative），简称Craf。配方见下表： 常备液 纳瓦申原液(ml) 纳瓦申固定液(ml) 桑弗利斯液(ml) Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ ? 甲 液 1%铬酸 ? 40 40 40 ? ? ? 10%铬酸 15 ? ? ? 8 10 13 铬酸 ? 15 20 20 60 70 ? 冰醋酸 10 ? ? ? ? ? 8 蒸馏水 75 45 40 40 32 20 79 乙液 福尔马林 40 10 10 10 20 30 64 蒸馏水 60 90 90 80 80 70 36 甲、乙两液均为贮备液，使用之前才将二者混合。适用于组织学和细胞学的研究材料。柔嫩而含水多的材料，可选用Ⅰ或Ⅱ固定，坚韧而成熟的材料，可用高浓度的Ⅳ或Ⅴ，一般材料多用Ⅲ。制作染色体和有丝分裂的纺锤体标本时，常用桑弗利斯固定液。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ固定液的固定时间为12~48h，桑弗利斯液固定时间为4~6h。 8. 铬酸-锇酸-醋酸固定液（Flemming fixative） 强液：10%铬酸水溶液3.1ml + 2%锇酸的铬酸（2%）水溶液12ml + 10%醋酸水溶液30ml + 蒸馏水 11.9ml中液：10%铬酸水溶液0.33ml + 2%锇酸的铬酸（2%）水溶液0.62ml + 10%醋酸水溶液3ml + 蒸馏水6.27ml弱液：10%铬酸水溶液1.5ml + 2%锇酸的铬酸（2%）水溶液5ml + 10%醋酸水溶液1ml + 蒸馏水96.5ml 此固定液需现用现配。固定23~48h。可用于各种植物组织的固定。 9.Lichent’s固定液1%铬酸水溶液15ml + 冰醋酸5ml +福尔马林80ml 此固定液适用于固定丝状藻类和真菌 1. 番红水溶液番红0.1g溶入蒸馏水,定溶至100ml。用前过滤。2. 番红乙醇溶液番红1g溶入50%（或95%）酒精,定溶至100ml。用前过滤。3. 固绿染液固绿0.1g溶入95%酒精，定溶至100ml。4. 碘-碘化钾染液碘化钾溶入100ml蒸馏水，再加入1g碘，溶解后即可使用。5. 苏丹Ⅲ（或Ⅳ）染液将0.1g苏丹Ⅲ或Ⅳ溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。6.改良苯酚品红染液原液A：将3g碱性品红溶入100ml 70